谷氨酰胺合成酶参与D-半乳糖诱导星形胶质细胞衰老过程

来源 :第十届北京国际康复论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chen406507025
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  目的:星形胶质细胞在大脑病理生理进程中承担着重要作用;然而,目前我们对于星形胶质细胞衰老相关性改变知之甚少,同时公认的星形胶质细胞体外衰老模型较为匮乏。因此,在本文中,我们首先尝试使用β-半乳糖苷酶染色方法,建立D-半乳糖诱导星形胶质细胞快速衰老模型。方法 使用β-半乳糖苷酶染色方法,建立D-半乳糖诱导星形胶质细胞快速衰老模型,同时通过电镜、免疫荧光染色等技术进行鉴定,进一步验证模型。并通过real-time PCR 和 western blot 检测衰老后细胞内的谷氨酰胺合成酶含量、线粒体功能和对抗谷氨酸兴奋性毒性损伤的能力。结果 结果显示,D-半乳糖(55mM)浓度处理细胞1 周,能够成功诱导星形胶质细胞出现衰老相关样改变,且电镜、免疫荧光染色等技术进一步验证模型建立成功。另外,针对衰老星形胶质细胞的研究显示,D-半乳糖诱导星形胶质细胞衰老后,胞内谷氨酰胺合成酶含量降低,线粒体功能受损,细胞应对谷氨酸兴奋性毒性损伤能力降低。结论 我们首次成功构建了D-半乳糖诱导星形胶质细胞体外衰老模型;并且,谷氨酰胺合成酶可能是参与D-半乳糖诱导星形胶质细胞衰老过程中的关键酶,因此有望成为预防星形胶质细胞衰老的靶点之一。
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