全反式维甲酸诱导人神经胶质瘤细胞的分化

来源 :中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:strongit_likai
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  目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导人神经胶质瘤细胞分化的作用并进一步探索其蕴涵的分子机制。方法:免疫荧光化学(Immunocytochemistry)检测角质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测GFAP、维甲酸α受体(RXRα)和细胞周期抑制蛋白(P21)在mRNA水平的表达。在COS-7和M059K细胞中,利用p21启动子荧光素酶报告基因,检测p21启动子的转录活性。结果:免疫荧光化学和RT-PCR实验表明,ATRA能明显增强GFAP在蛋白和mRNA水平的表达,同样RXRα和p21在mRNA水平的表达也随ATRA的浓度增加而升高。此外荧光素酶活性检测证实在COS-7和M059K细胞中ATRA能够促进p21启动子的转录活性。结论:ATRA可以诱导M059K细胞分化,其机制可能为ATRA诱导分化过程中ATRA和受体RXRα结合从而激活p21的转录。我们的发现为将来进一步探索胶质瘤分化的转录调节分子机制和分子治疗方法提供新的证据。实验方法:本论文以M059K细胞作为研究脑胶质瘤分化的对象,采用免疫荧光化学检测GFAP的表达,RT-PCR检测GFAP、RXRα和P21在mRNA水平的表达。在COS-7和M059K细胞中,利用p21启动子荧光素酶报告基因,检测p21启动子的转录活性。实验结果:(1)本实验稳定培养脑胶质瘤细胞(M059K),经不同浓度ATRA诱导后,用免疫细胞化学检测神经胶质细胞的分化标志物GFAP在蛋白水平上的变化。结果表明随着ATRA的浓度增加GFAP的表达量也相应增加。(2)经不同浓度ATRA诱导M059K细胞后,利用RT-PCR技术对神经胶质细胞分化标志物GFAP在mRNA水平上检测,结果显示随着全反式维甲酸的浓度增加GFAP的mRNA水平也相应增加。说明ATRA可以诱导人脑胶质瘤细胞向正常神经胶质细胞分化。
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