【摘 要】
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本文以蔗糖密度梯度离心提纯的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)免疫兔制备兔抗DHV-Ⅰ抗体,通过对各种反应物的工作浓度与作用时间的优化,建立了DHV的间接免疫荧光检测技术。结果表明建立的IFA与DHV-Ⅰ感染死亡或濒死雏鸭的肝脏等出现阳性反应,与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝脏以及健康雏鸭的肝脏出现阴性反应。感染DHV-Ⅰ死亡或濒死雏鸭的肝脏、脾脏、肾
【机 构】
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四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心,四川雅安 625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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本文以蔗糖密度梯度离心提纯的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)免疫兔制备兔抗DHV-Ⅰ抗体,通过对各种反应物的工作浓度与作用时间的优化,建立了DHV的间接免疫荧光检测技术。结果表明建立的IFA与DHV-Ⅰ感染死亡或濒死雏鸭的肝脏等出现阳性反应,与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝脏以及健康雏鸭的肝脏出现阴性反应。感染DHV-Ⅰ死亡或濒死雏鸭的肝脏、脾脏、肾脏、心脏、胸腺、法氏囊、胰腺、肠道IFA检测呈阳性或强阳性,DHV-Ⅰ抗原主要分布于感染细胞的细胞质。对65个临床病料进行了检测,检测结果与鸡胚分离法进行比对,结果符合率为96.1％。该法具有良好特异性,可用于DHV-Ⅰ在感染雏鸭组织细胞中的亚细胞定位、DHV-Ⅰ感染雏鸭的实验室诊断、甲醛固定组织的回顾性诊断。
其他文献
通过RT-PCR方法,以5种鲤科重要经济鱼类。草鱼、鳙鱼、鲫鱼、鲤鱼、齐口裂腹鱼的垂体总RNA为模板扩增出其生长激素(fGH)的完整ORF序列并克隆到pMD18-T载体上并命名为pMD-1(草鱼)、pMD-2(鳙鱼)、pMD-3(鲫鱼)、pMD-4(鲤鱼),pMD-5(齐口裂腹鱼)。测序结果显示其长度均为633bp。序列分析表明,所有ORF序列均以ATG为起始密码,以TAG为终止密码,编码210个
白介素-18(IL-18)是近年发现的一种重要的细胞因子,具诱生IFN-γ、促进T细胞增殖分化、增强GM-CSF和IL-2的产生及NK细胞、CTL细胞的活性等生物学功能。因此,IL-18在增强免疫、抗微生物感染、抗肿瘤等方面有着广阔的应用前景。近年来,IL-18的研究主要集中于人和鼠方面,而对鸡IL-18的研究则起步较晚,直到Schneider K首次获得ChIL-18 cDNA,此后潘蔚绮等、刘
为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-SDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本文将pcDNA-SDIFN-α以每只50、100和200μg三个剂量用肌肉注射法分别免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15 d后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗,接种后第3、7、14、21、28、35、49、63、84、105 d采血用淋巴细胞增殖试验(MTT
观察重组鸭α-干扰素体内抗鸭乙型肝炎病毒的作用。采用DHBV阳性血清感染1日龄的北京鸭作为乙型肝炎动物模型,将重组鸭α-干扰素按500 U、1000 U、2000 U三个剂量分别对感染鸭进行肌注治疗15d,同时设立拉米夫定对照组和生理盐水对照组,用荧光定量PCR检测治疗前后和停药后鸭血清、肝、胰、肾、脾、肺、心、脑、十二指肠等组织中DHBV DNA含量的变化。结果显示:拉米夫定对照组于用药后,血清
为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(peDNA-SDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本研究将pcDNA-SDIFN-α以1、3和6μg/只3个剂量用基因枪轰击法分别免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15d后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗,接种后第3、7、14、21、28、35,49、63,84 d采血用淋巴细胞增殖试验(MTT法)测定鸭外周血
本文将GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只200μg、100μg、50μg肌肉注射,6μg、3μg、1μg基因枪轰击的方法免疫30日龄四川白鹅,以生理盐水和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,于免疫接种后1h、12h、1d、3d、7d、21d、35d、63d、105d和217d采集全血以及各组织器官,用免疫组织化学方法检测pcDNA-GPV-VP3在雏鹅体内表达的时相
将本实验室构建的小鹅瘟VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别按每只6 μg基因枪轰击和100μg肌肉注射免疫BALB/c小鼠,小鹅瘟弱毒疫苗按每只100μL免疫BALB/c小鼠,以peDNA3.1(+)和生理盐水为对照。并于免疫后3、7、14、21、28、35、49、63、77、105 d采抗凝血用淋巴细胞转化实验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)分别检测小鼠外周血T淋巴细胞转化效果和
鸭α干扰素真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)以不同途径(基因枪轰击和肌注)免疫28日龄北京鸭,15天后接种DVH弱毒疫苗,同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水,DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鸭对照组,10只鸭/组,于DVH弱毒疫苗免疫后5,7、14、21、28、42、56、70d采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)和鸡胚中和实验分别对免疫鸭外周血的C
本文将GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只200μg、100μg、50μg肌肉注射,6μg、3μg、1μg基因枪轰击的方法免疫30日龄四川白鹅,以生理盐水和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,于免疫接种后1h、12h、1d、3d、7d、21d、35d、63d、105d和217d采集全血以及各组织器官,用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测pcDNA-GPV-VP3在
本文以蔗糖密度梯度离心提纯的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)免疫兔制备兔抗DHV-Ⅰ抗体,建立了间接免疫酶染色(ⅡS)检测石蜡组织切片中的DFIV-Ⅰ抗原的方法,并对DHV-I强毒人工感染死亡或濒死雏鸭的各个组织器官进行检测。结果表明建立的ⅡS与DHV-Ⅰ感染死亡或濒死雏鸭的肝脏等出现阳性反应,与鸭瘟病毒、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌,多杀性巴氏杆菌感染发病和死亡雏鸭的肝脏以及健康雏鸭的肝脏出现