熊果酸经ERK信号通路抑制血管内皮细胞的增殖

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目的:探讨熊果酸对人类脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖的影响及其机制。方法:体外培养HUVECs,用熊果酸处理HUVECs36h,以及熊果酸按浓度梯度(0、5、10、20、40、80μmol/L)和熊果酸20μmol/L按时间梯度(0、12、24、36、48h)处理HUVECs。MTT和台盼蓝染色法检测熊果酸对人类脐静脉内皮细胞增殖的作用。Westernblot法检测p-ERK1、ERK1、VEGFR2(Flk1)、c-Jun和cyclinD1蛋白的表达情况。免疫荧光法检测p-ERK1、ERK1、VEGFR2(Flk1)蛋白的表达和定位。激光共聚焦扫描显微镜检测ERK1蛋白的表达和移位情况。结果:熊果酸对人类脐静脉内皮细胞的抑制作用呈剂量-时间依耐性(P<0.05);HUVECs经熊果酸处理36h的半数抑制浓度为20μmol/L;Westernblot结果显示熊果酸抑制p-ERK1、ERK1、VEGFR2(Flk1)、c-Jun和cyclinD1蛋白的表达呈时间依耐性(P<0.05);免疫荧光法显示,经熊果酸处理后,p-ERK1、ERK1、VEGFR2(Flk1)蛋白的荧光强度比空白对照组和溶剂对照组明显减弱,且具有时间依耐性;激光共聚焦扫描显微镜显示经熊果酸处理的ERK1蛋白的荧光强度与空白对照组和溶剂对照组相比,明显减弱,且随着时间的增加,ERK1核内表达的荧光强度也逐渐减弱。结论:熊果酸可经ERK信号通路抑制人类脐静脉血管内皮细胞的增殖。
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