【摘 要】
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目的 探讨Nrf2在非细胞毒性剂量的吉非替尼逆转肝癌细胞多药耐药中的作用.方法 选取肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM及其亲本细胞HepG2为研究对象,采用MTT比色法检测HepG2/A
【出 处】
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中华医学会2012年第十三届中华肝胆胰脾外科专业学术论坛
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目的 探讨Nrf2在非细胞毒性剂量的吉非替尼逆转肝癌细胞多药耐药中的作用.方法 选取肝癌多药耐药细胞株HepG2/ADM及其亲本细胞HepG2为研究对象,采用MTT比色法检测HepG2/ADM细胞对多柔比星、5-氟尿嘧啶以及顺铂的化疗敏感性,MTT比色法确定无细胞毒性吉非替尼的剂量,检测吉非替尼逆转细胞耐药的能力;采用Western blot以及RT-PCR技术检测吉非替尼逆转耐药细胞中Nrf2的表达水平,通过免疫荧光法分析Nrf2的亚细胞定位,进一步采用RNA干扰技术使Nrf2的表达沉默,明确Nrf2对化学治疗易感性的影响.结果 HepG2/ADM不仅对诱导药物具有耐药性,而且对多种不同化疗药物也可以产生不同程度的耐药,其对多柔比星、5-氟尿嘧啶以及顺铂的耐药指数分别为16.33、6.83和4.16.当吉非替尼的浓度为2μmol/L时,可部分逆转HepG2/ADM细胞对多柔比星的耐药,逆转指数为2.96.通过对比发现Nrf2的表达水平在HepG2/ADM细胞及其亲本细胞HepG2中无显著性差异,但当用多柔比星对HepG2/ADM细胞进行干预时,其Nrf2的表达较HepG2明显上调,这种上调可以被2 μmol/L的吉非替尼显著抑制.此外多柔比星还介导了HepG2/ADM细胞中Nrf2从细胞浆到细胞核的转移,这种转移同样可以被吉非替尼所抑制.Nrf2的干扰RNA(Nrf2-siRNA)同样可以逆转HepG2/ADM细胞对多柔比星的耐药,逆转指数为2.45,同时还可抑制Nrf2的易位.结论 非细胞毒性剂量的吉非替尼可以通过抑制化疗药物诱导的Nrf2活化而逆转人肝癌细胞的耐药,其或可成为肝癌的辅助治疗药物.
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