论文部分内容阅读
目的:探讨芳香烃受体调控Caspase-依赖性通路在饮用水有机污染物致肝细胞毒性中的作用,为饮用水有机污染物致肝损伤机制的完善提供依据。方法:固相萃取法提取某地水样中有机污染物,气相色谱-质谱联用技术进行有机物检测。建立大鼠染毒模型,设立正常对照组、溶剂对照组和5L/kg、20L/kg、80L/kg染毒组,染毒3个月。采用全自动生化分析仪、流式细胞仪进行肝细胞毒性检测。运用实时荧光定量聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹法检测相关基因的mRNA转录及蛋白表达。结果:1.该地管网末梢水检出14种有机物。其中,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)及邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate,DBP)含量均超过限值要求,其余有机物检测结果则符合标准要求或低于检出限。2.染毒大鼠血清中的DEHP及DBP含量均明显高于对照组(P<0.05)。大鼠血清AST、ALT及CHE活性在中、高剂量组明显高于对照组(P<0.05)。大鼠肝细胞凋亡率在中、高剂量亦明显升高(P<0.05)。3.死亡受体信号通路:Fas、FasL、Caspase 8及Caspase 3的mRNA转录及蛋白表达水平均在中、高剂量组明显升高(P<0.05)。PARP-1的mRNA转录及蛋白表达水平则在中、高剂量明显降低(P<0.05)。4.线粒体通路:Bcl-2的mRNA转录及蛋白表达水平随染毒剂量的增加而下调(P<0.05),Bax、CytC及Caspase9的mRNA转录及蛋白表达水平则随染毒剂量的增加而上调(P<0.05)。5.内质网通路:Calpain-1及Caspase12的mRNA转录及蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。6.AhR调控:中、高剂量组的AhR与GSTA1的mRNA转录及蛋白表达水平均较对照组明显升高(P<0.05)。结论:1.该地饮用水中存在以DEHP及DBP等苯甲酸酯类为主的有机物污染。2.饮用水有机提取物通过上调AhR及GSTA1表达水平、激活Fas/FasL信号通路及线粒体通路,可能是该地饮用水有机污染物导致肝细胞凋亡、肝细胞损伤的重要发生机制。