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目的:观察刀豆蛋白(ConA)诱导转基因小鼠慢性免疫性肝损伤肝组织中淋巴细胞FasL和FaS表达情况,探讨细胞凋亡在其中的作用及中药对其的影响。
方法:选用转基因小鼠72只,雌雄各半,随机分为模型组、正常对照组、联苯双酯组、茵陈组、茵陈蒿汤组、荣肝合剂组。正常组小鼠尾静脉注射PBS溶液0.3ml,其他各组按ConA12μg/gwt以0.9%的生理盐水稀释(浓度为1mg/ml),尾静脉注射造模,每周一次,连续6wk,制备慢性肝损伤模型。造模成功后模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃,各治疗组灌胃给药,每日一次,连续4wk,末次药后24h(实验前禁食12h),摘眼球取血检测血清中ALT,AST活性;取肝组织光镜下观察其病理变化,流式细胞仪检测肝组织T淋巴细胞中FasL和Bcl-2所占比例情况。
结果:
①酶学变化:与模型组比较,各中药组均可以降低血清ALT, AST的水平,茵陈篙汤组、荣肝合剂组的降酶作用虽较联苯双醋组的差,但无统计学差异(P>0.05 )。
②病理组织学变化;与模型组比较,荣肝合剂组及茵陈篙汤组肝组织纤维增生及细胞坏死较轻(P<0.05 ),显示出二者对慢性肝组织的病理损伤有较好的改善作用;而联苯}}酷组与茵陈组病损程度相似,与模型组比较,肝细胞变性坏死及纤维化程度无显著差异(P>0.05 )。
③细胞凋亡相关基因的检测;与正常组相比,模型组的Fast表达显著增高(P<0.05 ),而凋亡抑制基因Bcl-2表达无显著变化(P>0.05 );与模型组相比,荣肝合剂组和茵陈篙汤组的bcl-2表达量明显升高( P<0.01)。
结论:中药复方不仅可减轻肝组织的炎症损害,还可通过对Fast和6c1-2表达的调节,减少细胞凋亡或促进细胞繁殖,在免疫性肝损伤的发生中起重要作用。