【摘 要】
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本研究旨在检测牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4刺激RAW264.7细胞诱导产生的细胞因子,及其信号传递途径,为阐明牛分枝杆菌的先天性免疫机制提供支持.为了分析牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞生长影响的最佳时间点和最佳剂量,本实验采用RTCA实时动态技术检测,结果发现rTB10.4对RAW264.7细胞的诱导作用开始于0.5h内,在12h-24h起效,在16-18h达到最大效应值,
【机 构】
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中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193
【出 处】
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2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微
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本研究旨在检测牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4刺激RAW264.7细胞诱导产生的细胞因子,及其信号传递途径,为阐明牛分枝杆菌的先天性免疫机制提供支持.为了分析牛分枝杆菌重组蛋白TB10.4对RAW264.7细胞生长影响的最佳时间点和最佳剂量,本实验采用RTCA实时动态技术检测,结果发现rTB10.4对RAW264.7细胞的诱导作用开始于0.5h内,在12h-24h起效,在16-18h达到最大效应值,作用呈现剂量依赖性；采用不同剂量rTB 10.4对RAW264.7细胞进行刺激,不同时间采用ELISA检测细胞因子的产生,结果发现rTB10.4能够显著诱导RAW264.7细胞产生TNF-α,IL-6和IL-12 p40,且呈剂量依赖关系；采用TLR2和TLR4的抗体进行阻断实验,结果表明rTB10.4诱导RAW264.7细胞产生TNF-α、IL-6和IL-12 p40细胞因子可能是依赖TLR2通路传递信号,为进一步研究rTB10.4激活RAW264.7细胞所依赖的信号通路提供理论基础.
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