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目的:研究刺参酸性粘多糖(SJAMP)对人肝癌HepG2细胞的凋亡诱导作用,观察SJAMP对于肝癌细胞线粒体凋亡通路的影响并探讨其可能的作用机制.
方法:体外培养HepG2细胞,将0.25μg/mL、1.0μg/mL、4.0μg/mL的SJAMP分别作用于HepG2细胞一段时间后,采用流式细胞仪检测SJAMP作用于HepG2细胞后对线粒体膜电位以及凋亡率的影响;选用免疫细胞化学法检测SAJMP作用于HepG2细胞后内凋亡基因蛋白Bcl-2家族中Bax及Bcl-2蛋白、抗凋亡蛋白生物素Survivin、第二线粒体Caspse家族激活蛋白Smac、细胞色素C(Cytc)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)前后对其表达的影响.
结果:①流式细胞仪检测结果显示:与空白对照组相比,随着SJAMP作用剂量的增加,各HepG2细胞组内的线粒体膜电位逐渐下降,各剂量组间的差异具有显著性(p＜0.05);②凋亡率检测结果显示:与空白对照组相比,随着SJAMP作用剂量的增加,各HepG2细胞组内的凋亡率逐渐上升,各剂量组间的差异具有显著性(p＜0.05);免疫细胞化学结果表明:与空白对照组相比,随着SJAMP作用剂量的增加,HepG2细胞内Bax、Cytc、Smac以及Caspase-3蛋白的表达逐渐增强,且Bcl-2和Survivin蛋白的表达被抑制,各剂量组间的差异具有显著性(p＜0.05);而张氏细胞Bax、Bcl-2、Cytc、Smac、Survivin以及Caspase-3蛋白的表达并没有随着SJAMP作用剂量的增加而改变,各剂量组间的差异没有统计学意义(P＞0.05).
结论:SJAMP可通过抑制Bcl-2及Surviving和促进张氏细胞Bax、Cytc、Caspase-3以及Smac蛋白的表达,激活线粒体介导的凋亡通路,从而促进肝肿瘤HepG2细胞发生凋亡.