论文部分内容阅读
目的:研究考察左归丸胚胎期干预对宫内高糖环境出生F1代大鼠IGT的预防效果及机制.方法:将F0代孕鼠随机分为正常对照组(C)、宫内高糖组(M)、左归丸干预组(10g·kg-1)、胰岛素干预组(20 IU·kg-1)、联合干预组(F)共五组.受孕当日,除正常对照组外,其余四组孕鼠采用链脲佐菌素(45mg·kg-1)腹腔注射复制宫内高糖环境模型.于孕3d开始给药,每日1次,至孕19d.孕19d时处死部分孕鼠, ELISA法检测孕鼠血糖,血清胰岛素、皮质酮浓度;称量并记录胎鼠重量;采用RT-PCR和Western blot技术,检测孕鼠胎盘羟基类固醇酶11β-HSD2的mRNA和蛋白表达水平.F1代大鼠从第6周开始,喂饲高糖高脂饲料,正常对照组继续喂饲普通饲料.每周对各组大鼠进行一次糖耐量负荷试验,待模型组大鼠出现IGT后,处死各组大鼠.观察F1代大鼠出生体重及生长曲线;全自动生化仪检测大鼠空腹血糖、血脂水平;ELISA法检测血清胰岛素、脂联素;HE染色观察肝脏、胰腺病理形态,透射电镜观察胰岛细胞超微结构;采用RT-PCR技术对与胰岛细胞发育、IGT及糖尿病发病密切相关的遗传易感基因APN的mRNA表达水平进行检测;并采用亚硫酸氢盐测序法检测APN基因的甲基化状态.