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目的:目前感染在慢性鼻窦炎(Chronic Rhinosinusitis,CRS)的发生、发展中所起的确切作用虽仍有争议,但其与CRS存在重要相关性已是共识.金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)作为CRS的主要致病菌在其病理过程中发挥着重要作用,表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,S.epidermidis)虽为条件致病菌,但因其在CRS患者中检出率高、形成生物膜能力强,其在CRS发病过程中的作用也日益受到重视.目前临床中S.aureus和S.epidermidis对抗生素的耐药率高且多为多重耐药菌的现状极大的制约了现有手段治疗这部分CRS患者的疗效。光敏疗法(Photodynamic Therapy,PDT)是结合光敏剂分子和可见光产生的活性氧物种对病原微生物进行灭活的一种抗菌方法,活性氧物种能够与致病菌中的多种生物活性分子反应,这一特性使得微生物不易对该方法产生耐药性,使其在细菌耐药性感染的治疗中具有巨大的应用前景。但目前PDT对CRS相关临床耐药菌株的杀伤作用仍鲜有研究,基于此本实验使用二代光敏剂5-氨基酮戊酸(5-Aminolevulinic acid,ALA),旨在检测PDT对取材自CRS患者的多重耐药菌S.aureus和S.epidermidis的杀伤作用,为此治疗手段在CRS治疗中的应用打下基础。
方法:选取保守治疗无效的CRS(息肉/非息肉组)患者,术前两周禁用抗生素,于术中使用拭子自中鼻道处取材鼻腔分泌物后立即送至检验科进行菌种鉴定及药敏分析。使用LED光动力治疗仪、ALA光敏剂,将光输出波长设定为633±lOnm进行单纯药物处理和单纯光照的安全性测定,选定参数后进行细菌杀伤效率检测,获得存活的菌落形成单位(colony forming unit,CFU)并将测得的CFU进行以10为底的对数转换后进行统计分析。
结果:共取材细菌21株,其中S.aureus 9株和S.epidermidis l2株,皆为多重耐药菌。根据实验结果选定实验参数为:ALA浓度5Mm,光输出功率密度100mW/cm2,光照时长60分钟。对数转换后存活CUF统计结果为:S.aureus对照组8.14±0.28,实验组5.12±0.72(P<0.01),S.epidermidis对照组8.38±0.14,实验组5.79±0.30(P<0.01)。
结论:本实验初步验证了利用ALA作为光敏剂,LED作为光源的PDT能于体外强有力杀伤CRS患者鼻腔来源的耐药葡萄球菌,为后续的安全性和体内实验及该治疗手段的最终临床应用奠定了基础。