【摘 要】
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目的 卵泡膜细胞在卵泡生长过程中起着重要作用：合成雄激素,通过旁分泌与颗粒细胞、卵子相互影响,维持卵泡的结构.卵泡的血管分布在卵泡膜层里,血循环中各种细胞因子可作
【出 处】
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广东省医学会第五次生殖医学学术会议
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目的 卵泡膜细胞在卵泡生长过程中起着重要作用：合成雄激素,通过旁分泌与颗粒细胞、卵子相互影响,维持卵泡的结构.卵泡的血管分布在卵泡膜层里,血循环中各种细胞因子可作用于卵泡膜细胞,并影响颗粒细胞及卵子.瘦素(Leptin)是一种脂肪细胞分泌的多效性激素,受体广泛分布于机体各组织细胞,可调节食物摄入、能量代谢、机体构成及生殖功能.Leptin可作用于下丘脑、垂体,影响生殖内分泌.Leptin亦可作用于卵巢颗粒细胞,抑制雄烯二酮转化成雌激素.卵巢卵泡膜细胞表达Leptin受体,Leptin对卵泡膜细胞的单独作用尚不明确,本研究拟研究Leptin对卵泡膜细胞增殖、类固醇激素合成的影响.方法 实验采用3-4周龄昆明小鼠,分离提纯卵泡膜间质细胞.用免疫荧光法检测小鼠Cyp17a1蛋白及FSH受体以判断卵泡膜间质细胞的纯度.小鼠卵泡膜间质细胞原代培养48小时后换成无血清培养基,并添加不同浓度小鼠Leptin(0,30,100,300ng/ml),加药24小时后用CCK8试剂盒检测小鼠卵泡膜间质细胞增殖情况.小鼠卵泡膜间质细胞原代培养48小时后换成无血清培养基,添加不同浓度Leptin(0,100ng/ml),加药后24小时用化学发光法检测培养基中孕酮、睾酮及雌二醇的浓度.使用SPSS13.0软件进行统计分析,两个样本比较采用T检验,多组比较采用单因素方差分析检验,若有统计学意义则进行Tukey HSD检验.结果 所分离细胞95％表达Cyp17a1蛋白,0％表达FSH受体.小鼠卵泡膜间质细胞原代培养72小时后分泌孕酮及睾酮,前者浓度约为后者的10倍,培养基中未检测到雌二醇.Leptin促进小鼠卵泡膜间质细胞增殖,Leptin100ng/ml及300ng/ml均使细胞增殖约2.5倍(P＜0.05).Leptin促进卵泡膜间质细胞孕酮的分泌,Leptin100ng/ml组培养基的孕酮水平较对照组升高2.8倍(P＜0.05),Leptin对卵泡膜间质细胞睾酮的分泌无明显作用.结论 Leptin可促进小鼠卵泡膜间质细胞增殖,促进卵泡膜间质细胞分泌孕酮,对卵泡膜间质细胞睾酮分泌的作用不明显.
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