一例犊牛腹泻大肠杆菌的分离与鉴定

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【背景】犊牛腹泻是一种犊牛在出生一个月内最易发生的疾病,大肠杆菌(Esch.coli)是主要的病原菌之一。【目的】为犊牛腹泻病的预防提供理论依据。犊牛腹泻是1月龄以内的犊牛出现一种以消化不良、腹泻为主要症状的消化道疾病,是造成犊牛死亡的主要疾病之一,同时引起犊牛腹泻的细菌种类不同,细菌的血清型也可能存在着地区差异型。【方法】无菌采取发病牛粪便,进行细菌的纯培养及动物实验筛选致病菌株,利用16S r RNA基因测序,建立病原菌系统进化树,结合致病菌O抗原检测和BD Phoenix TM100全自动微生物鉴定及药敏系统对病原菌进行分析鉴定,最终确定该致病菌的种类并进行治疗与后期防控。【结果】根据致病茵的O抗原单因子血清检测、16S r RNA基因测序,构建的系统进化树以及BD PhoenixTM100全自动微生物鉴定及药敏系统鉴定,确定该致病菌株为大肠杆菌O132型并命名为DG;药敏结果显示,该大肠杆菌对阿米卡星、亚胺培南、美洛培能、哌拉西林四种药物敏感,对庆大霉素、头孢唑肟和头孢他啶等13种药物耐药;进化树分析显示该菌与人腹泻的肠膜分离(CP024978.1)、患者粪便分离(CP024992.1)大肠杆菌的亲源性达100%。【结论】该例犊牛腹泻是由大肠杆菌O79型导致。【讨论】犊牛腹泻常发生在1月龄内,在犊牛出生后2-3天就可以感染发病,因为新生犊牛自身免疫力较低,容易感染环境中的致病菌,另外,气候的突变与牛舍的环境较差等外界因素,也会诱导此病的发生,对犊牛的生长发育有着很大的影响[1]。据报道,犊牛腹泻发病率可以达到60%,死亡率高达30%,严重影响养殖企业的发展[2]。因此,通过此次实验室检查对于犊牛腹泻病原的研究及治疗有重要的意义。该例患病犊牛处于1月龄内,临床上以腹泻为主,粪便稀薄且为灰白色,精神沉郁,日渐消瘦。对病死犊牛进行剖检,主要为肠炎变化,肠道出血,其中十二指肠呈现较为严重的状态,肠内容物成糊状,颜色乳白且部分粘在黏膜上,肠系淋巴结轻微肿胀,胃黏膜也肿胀并伴有轻微出血。肝脏出血较为严重,肾脏表面有出血点,心脏表有针尖样出血点。
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