【摘 要】
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目的:为了明确凋亡抑制蛋白survivin表达在肝癌细胞中的早期化疗耐药中的作用.我们分析肝癌细胞株Hep G2在化疗药物治疗后凋亡的发生情况,并探讨survivin mRNA和蛋白的表达水平及细胞定位变化如何参与肝癌细胞早期化疗耐药.方法:通过MTT检测肝癌细胞株Hep G2对于1.0μg/ml顺铂,1μmol/L阿霉素,及1.0μ g/ml吉西他滨的敏感程度;通过RT-PCR检测survivi
【出 处】
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2012年全国肿瘤分子标志学术大会与国际肿瘤转化医学论坛暨第七届中国中青年肿瘤专家论坛
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目的:为了明确凋亡抑制蛋白survivin表达在肝癌细胞中的早期化疗耐药中的作用.我们分析肝癌细胞株Hep G2在化疗药物治疗后凋亡的发生情况,并探讨survivin mRNA和蛋白的表达水平及细胞定位变化如何参与肝癌细胞早期化疗耐药.方法:通过MTT检测肝癌细胞株Hep G2对于1.0μg/ml顺铂,1μmol/L阿霉素,及1.0μ g/ml吉西他滨的敏感程度;通过RT-PCR检测survivin在正常肝脏组织,肝癌组织及肝癌细胞株Hep G2中表达情况;通过RT-PCR和Western blot检测Hep G2中survivin mRNA和蛋白在顺铂,阿霉素,吉西他滨干预后不同时间段表达水平的变化.通过胞浆胞核蛋白分离检测化疗药物干预后Hep G2中survivin的细胞定位是否发生变化.结果:Hep G2细胞活力在药物干预12小时内并无明显改变.在顺铂和阿霉素治疗24小时后,大多数肝细胞表现出有限的细胞死亡.培养72小时后,20%的Hep G2细胞仍然存活.吉西他滨培养72小时后,仍有大于10%的Hep G2细胞存活.顺铂和吉西他滨干预48小时后相对survivin mRNA和蛋白表达升高(P<0.01).阿霉素干预48小时后相对survivin mRNA表达升高(P<0.01),survivin蛋白表达并未见明显变化(P>0.05).顺铂和吉西他滨干预Hep G2 48小时后存活的的肝癌细胞胞浆survivin表达增加(P<0.0l),细胞核中survivin的表达减少(P<0.01).结论:顺铂和吉西他滨耐药的肝癌细胞早期化疗耐药机制包含survivin mRNA和蛋白水平升高和细胞内定位的变化.
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