复杂生物样品中的多种指示性分子和生物标记物的检测在疾病诊断和临床治疗中具有十分重要的作用。常用分步检测多种待测物的方法需要重复采样,导致检测结果的准确性低,样品预处理耗时费力。因此,构建背景低、无光漂白效应的新型检测方法1-4,实现同一复杂生物样品中多种待测样品无干扰的原位顺序检测是十分必要的。我们合成了一种环境友好的双酶的核壳结构的纳米粒子,并基于化学发光实现了同一生物样品中ATP-H2O2的原位顺序检测和成像,并将该方法应用于临床肺癌患者血清样本中和活体内ATP和H2O2的原位顺序检测及成像。通过化学发光信号可以检测裸鼠体内内源性ATP和H2O2,通过注射不同浓度的外源性ATP和H2O2发现随着待检测物浓度增强化学发光信号增强,实现ATP和H2O2体内可视化检测(图1)。这种基于化学发光的检测方法无需激发光源,避免了光毒性和光漂白效应,低背景、相互间无干扰,对多种物质的原位顺序检测具有高灵敏度和高选择性,在临床诊断和疾病治疗中具有潜在的应用价值。