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目的：筛选双黄连口服液抗H5N1禽流感病毒的活性部位。方法：按《中国药典》2010年版制备双黄连口服液、金银花和连翘的总提物及各极性部位；采用H5N1假病毒检测体系，观察各样品在MDCK细胞中对A/Thailand/Kan353/2004 H5N1毒株假病毒进入的抑制作用；并且结合以VSVG基因克隆质粒和HIV包膜蛋白基因缺失的骨架质粒构建的VSVG假病毒为阴性对照，判定抑制剂是特异性作用于禽流感病毒的进入环节。采用XTT法测定各样品的毒性。结果：双黄连口服液能特异性的抑制高致病性禽流感H5N1假病毒的进入，金银花和连翘总提物对HSN1禽流感病毒有抑制活性，其中乙酸乙醋部位和正丁醇部位作用最强。结论：双黄连口服液以及金银花和连翘总提物能特异性的抑制HSN1假病毒，其中乙酸乙酯部位和正丁醇部位作用为活性部位，很可能从中分离得到能抑制流感病毒进入靶细胞的活性单体化合物。