对278株非结核分枝杆菌临床株进行菌种鉴定和克拉霉素的药敏试验研究

来源 :中华医学会结核病学分会2014年学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuning2007
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  目的 将非结核分枝杆菌(Non-tuberculosis mycobacteria,NTM)分为不同菌种,了解不同菌种在NTM中所占比例;并分别对不同菌种进行克拉霉素的药敏试验,了解不同菌种对克拉霉素的敏感情况。方法 通过16S rRNA的引物将278株NTM临床分离株的DNA进行聚合酶链反应,并将菌株的16S rRNA基因片段进行测序,在基本局部比对搜索工具比对,进行菌种鉴定;通过rpoB和hsp65的引物将70株脓肿分枝杆菌临床分离株的DNA进行PCR,并将菌株的rpoB和hsp65基因片段进行测序,在BLAST上进行比对,从而将脓肿分枝杆菌分为不同亚种;使用ALamar蓝微孔板二倍稀释法对所有NTM临床株进行克拉霉素的药敏试验,对实验结果进行包括最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)值范围、MIC50、MIC90、敏感比例、中等敏感比例、耐药比例等数据的分析。结果 根据16S rRNA将278株NTM临床株又分为快生长分枝杆菌(Rapidly growing mycobacterium,RGM)和慢生长分枝杆菌(Slowly growing mycobacterium,SGM),其中RGM 100株(36%),包括脓肿分枝杆菌(25%)、偶发分枝杆菌(8%)、Fuerth分枝杆菌(2%)和龟分枝杆菌(1%);SGM 178株(64%),包括胞内分枝杆菌(47%)、堪萨斯分枝杆菌(12%)和戈登分枝杆菌(5%)。根据rpoB和hsp65基因片段将脓肿分枝杆菌又分为Abscessus亚种和Massiliense亚种,其中Abscessus亚种45株,Massiliense亚种25株;大部分的Massiliense亚种(96%)、偶发分枝杆菌(92%)和堪萨斯分枝杆菌(100%)对克拉霉素敏感,而大部分Abscessus亚种(83%)对克拉霉素耐药,所有龟分枝杆菌(5株)和Fuerth分枝杆菌(2株)对克拉霉素敏感。结论 使用16S rRNA可将278株NTM再分为7种不同菌种,RGM中脓肿分枝杆菌占RGM的大部分,而龟分枝杆菌和Fuerth分枝杆菌数量较少;SGM中胞内分枝杆菌占大部分,而戈登分枝杆菌数量较少,使用rpoB和hsp65可将脓肿分枝杆菌再分为Abscessus亚种和Massiliense亚种;除Abscessus亚种外,克拉霉素对Massiliense亚种、偶发分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、龟分枝杆菌和Fuerth分枝杆菌都表现出了很好的抑菌活性。
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