【摘 要】
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目的 用双向电泳和免疫印迹技术寻找能刺激机体产生IgG4亚类抗体的特异囊尾蚴抗原成分.方法 囊液抗原经双向电泳分离后,Phoretix 2D软件分析凝胶图像,蛋白双向电泳后转膜
【机 构】
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山东省医学科学院,山东省寄生虫病防治研究所,济宁 272033
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目的 用双向电泳和免疫印迹技术寻找能刺激机体产生IgG4亚类抗体的特异囊尾蚴抗原成分.方法 囊液抗原经双向电泳分离后,Phoretix 2D软件分析凝胶图像,蛋白双向电泳后转膜,用囊虫病人血清作为一抗,碱性磷酸酶标记的抗人IgG4作为二抗进行免疫印迹分析,经质谱分析后获取蛋白样品的肽质量指纹图,鉴定抗原.结果 囊液抗原经双向电泳检测到201±5个蛋白斑点,免疫印迹分析显示与患者血清中特异IgG4抗体结合的抗原以小分子量蛋白为主,筛选出51个(抗原)点进行质谱分析,有21个点与10种囊虫蛋白相关,其中最为密切相关的有Ts8B3、Ts8B2、10ku 抗原和Sequence 3.结论 筛选出的Ts8B3、Ts8B2、Sequence 3和10ku抗原为抗猪囊尾蚴特异IgG4抗原,为下一步重组抗原制备和应用打下了基础.
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