孕期酒精暴露对子代大鼠学习记忆及海马NR2B表达的影响

来源 :第十三次全国行为医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:alangao12345
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  目的:研究孕期酒精暴露对子代大鼠学习记忆及海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)表达的影响。方法:清洁级健康2月龄SD雌性大鼠24只,雄性大鼠8只,应用随机数字表将雌性大鼠随机分为正常对照组、饮酒对照组和孕期酒精暴露组。正常对照组在试验期间一直使用普通饮水饲养作为对照。参照文献方法制备孕期酒精暴露模型[2],饮酒对照组和孕期酒精暴露组开始予体积分数为3%的酒精饲养,每日增加酒精体积分数1%。直至酒精体积分数为20%后停用酒精。采用阴道涂片法(vagihal smeartest)检测各组雌性大鼠阴道脱落上皮细胞,从而确定大鼠的发情周期。确定雌鼠处于发情期后,将其与性成熟期雄性大鼠以雌雄比例1:1于20:00至次晨8:00共处12 h,次日晨观察雌鼠阴道栓的形成情况以确定是否怀孕。受孕当天记为G0。在孕期酒精暴露组成年母鼠的孕期第9天(G9)8:00开始,使用体积分数为20%的酒精饲养。至孕期第13天(G13)8:00停止酒精饲养并恢复至普通饮水,建立大鼠孕期酒精暴露模型。子代成年后,Y-型迷宫测试学习记忆成绩;聚合酶链式反应(RT—PCR)分析海马组织NR2B mRNA的表达;免疫荧光法检测子鼠海马区NR2B蛋白表达。结果:学习记忆测试结果显示孕期酒精暴露组子鼠学习记忆成绩(43.00±15.33)比正常对照组(25.13±12.35)和饮酒对照组(26.12±11.95)明显下降(t=2.57,t=2.46,P均<0.05);RT—PCR结果表明孕期酒精暴露组子鼠海马组织NR2B mRNA表达(0.97±0.14)较正常对照组(0.52±0.10)和饮酒对照组(0.62±0.12)明显上升(t=7.22,t=1.67,P均<0.01);免疫荧光结果显示NR2B在海马区神经元细胞表达,阳性细胞胞质呈红色。孕期酒精暴露组与正常对照组及饮酒对照组相比较,镜下见大量的荧光着色细胞,分布密集,且荧光强度增加。结论:孕期酒精暴露对子代大鼠的神经损伤可能与NMDA受体亚基NR2B蛋白表达的上调有关。
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