【摘 要】
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谷氨酰胺合成酶(简称GS,glutamine synthetase;EC6.3.1.2)是一种控制氮代谢的酶,它不仅被细胞来合成蛋白质,也是用来运输氮,是生物体氮代谢的关键酶之一.本文对来源于谷氨酸
【机 构】
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江南大学生物工程学院,无锡214122
【出 处】
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2015中国生物发酵产业系列专题论坛
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谷氨酰胺合成酶(简称GS,glutamine synthetase;EC6.3.1.2)是一种控制氮代谢的酶,它不仅被细胞来合成蛋白质,也是用来运输氮,是生物体氮代谢的关键酶之一.本文对来源于谷氨酸棒杆菌ATCC13761中的GS基因ghA进行过定点突变,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中克隆表达得到GS';粗酶液经过镍柱纯化,用LX-1000EP树脂进行固定化,并比较其酶学性质.研究表明,定点突变后表达的GS'酶活力提高5倍.固定化酶和纯酶最适反应温度相同,但固定化酶最适pH往碱性方向偏移,对Mg+耐受浓度更高.
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