【摘 要】
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目的 通过特异性ADMR及CRLR干扰观察对结肠癌细胞侵袭的影响.方法 特异性ADMR及CRLR干扰后,采用Transwell实验研究ADMR及CRLR对结直肠癌细胞迁移及侵袭的影响.结果 相对于对照组,无论单纯干扰ADMR或CRLR,还是联合干扰ADMR和CRLR,Transwell细胞迁移对照实验结果均显示RKO细胞迁移显著抑制(10.8±2.5,9.9±1.8,5.8±2.0/17.1±2.
【机 构】
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浙江大学医学院附属浙二医院 浙江大学医学院附属邵逸夫医院
【出 处】
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第八届浙江国际消化病学术大会暨美国胃肠病协会第二届中国学术论坛
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目的 通过特异性ADMR及CRLR干扰观察对结肠癌细胞侵袭的影响.方法 特异性ADMR及CRLR干扰后,采用Transwell实验研究ADMR及CRLR对结直肠癌细胞迁移及侵袭的影响.结果 相对于对照组,无论单纯干扰ADMR或CRLR,还是联合干扰ADMR和CRLR,Transwell细胞迁移对照实验结果均显示RKO细胞迁移显著抑制(10.8±2.5,9.9±1.8,5.8±2.0/17.1±2.9,p均＜0.01),尤其以联合干扰组的作用最为显著.在对转染了空载的细胞重新添加外源性ADM 50nmol/L后,重见RKO细胞的迁移增加(从17.1±2.9至37.3±4.9),但是在ADMR、CRLR已下调后再外源性增加ADM,对细胞迁移增加的能力受限.同样在HT-29细胞迁移实验中也观察到了一致的结果.表明ADM对结肠癌细胞促迁移能力依赖于特异性受体；Transwell细胞侵袭试验结果显示,相对于对照组,特异性干扰RKO细胞,无论单纯或联合干扰ADMR和CRLR,都可以显著抑制癌细胞的侵袭(12.6±1.4,11.8±1.8,6.9±2.0/17.1±1.2,p均＜0.01),在转染了空载的细胞中再外源性添加ADM50nmol/L后,可以促进细胞的侵袭(从17.1±1.2至29.3±2.6),在ADMR、CRLR特异性下调后再外源性增加ADM,促进细胞侵袭的能力明显受限.在HT-29细胞侵袭实验中也观察到了一致的结果,说明ADM对结肠癌细胞促侵袭能力依赖于特异性受体.结论 成功地将特异性构建的慢病毒ADMR shRNA和CRLR shRNA表达载体转导至结直肠癌细胞RKO和HT-29,能有效干扰ADMR及CRLR表达,并抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭等恶性行为.并证实ADM是通过特异性受体使癌细胞产生恶性生物学行为.
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