【摘 要】
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目的 阐明吗啡导致小胶质细胞免疫抑制的分子机制.方法 采用不同浓度吗啡处理小胶质细胞BV2不同时间，运用定量PCR和免疫杂交检测吗啡对miR-124、TRAF6和p65表达影响.采用miR-124 mimic和inhibitor转染BV2细胞，运用免疫杂交检测TRAF6和p65蛋白表达.采用生物信息学，预测miR-124与靶基因TRAF6和p65结合位点，及转录因子p65与miR-124 3个转录
【出 处】
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第六届广东省中西医结合神经科学术会议
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目的 阐明吗啡导致小胶质细胞免疫抑制的分子机制.方法 采用不同浓度吗啡处理小胶质细胞BV2不同时间，运用定量PCR和免疫杂交检测吗啡对miR-124、TRAF6和p65表达影响.采用miR-124 mimic和inhibitor转染BV2细胞，运用免疫杂交检测TRAF6和p65蛋白表达.采用生物信息学，预测miR-124与靶基因TRAF6和p65结合位点，及转录因子p65与miR-124 3个转录本的启动子区结合位点.采用双荧光素酶报告基因分析系统，分析miR-124与靶基因3-UTR结合，及转录因子p65与miR-124启动子结合情况.采用染色质免疫共沉淀，分析转录因子p65与miR-124启动子区预测位点结合程度.结果 不同浓度吗啡导致BV2细胞miR-124成熟体和初始体表达水平增高，呈现剂量依赖性.吗啡处理BV2细胞不同时间点导致miR-124表达增高，呈现波动性.吗啡刺激和miR-124转染BV细胞均导致促炎因子生成减少.TRAF6和p65是miR-124直接靶基因.过表达P65导致miR-124成熟体和初始体表达上调，敲低p65表达则下调miR-124表达.短时吗啡刺激导致BV2细胞核和细胞浆p65表达升高，而长时吗啡刺激则导致p65表达下降.结论 miR-124参与介导吗啡诱导的小胶质细胞免疫抑制.
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