【摘 要】
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人穿孔素(perforin,PFN)是一种具有很强的溶细胞活性的蛋白质.为了观察人穿孔素羧基端肽段在肺癌细胞SPC-A1中的放射诱导表达及其对细胞的杀伤活性,构建了含放射诱导启动子的
【机 构】
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南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所,南京,210002
【出 处】
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2007年全国感染性疾病实验室诊断研讨会
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人穿孔素(perforin,PFN)是一种具有很强的溶细胞活性的蛋白质.为了观察人穿孔素羧基端肽段在肺癌细胞SPC-A1中的放射诱导表达及其对细胞的杀伤活性,构建了含放射诱导启动子的真核表达载体pcDNA3.1(+)/Egr-1/hPFN-C,转染SPC-A1细胞,并经X射线照射诱导.用RT-PCR、免疫细胞化学方法检测该基因片段在SPC-A1中的表达,MTT法检测该基因片段的表达产物对SPC-A1细胞的杀伤活性。RT-PCR结果显示,X射线照射后在转染细胞中有hPFN-C的mRNA表达,免疫细胞化学法证实目的蛋白出现在细胞质中,而未照射的细胞则没有hPFN-C基因表达。MTT法检测显示,与对照组相比,有hPFN-C表达的SPC-A1细胞存活率降低了34.3%。本项研究结果表明,hPFN-C基因片段可在SPC-A1细胞中可控性表达,且该表达产物对细胞具有明显的杀伤活性。
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