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目的:观察不同培养条件下小鼠骨髓耐受性树突状细胞(tolerogenic dendritic cell,tDCs)的形态、细胞表型及GPIIb特异性tDCs的功能变化,并探索IL-10/TGFβ1诱导的GPIIb特异性tDCs对小鼠免疫性血小、板减少症(ITP)的影响.
方法:取小鼠的骨髓细胞作为DC的前体细胞,在含rmGM-CSF、rmIL-4、rmIL-10、rhTGFβ1、LPS等因子的含10%FBS的RPMI1640培养基中按不同的组合分为五组进行体外诱导培养:iDC组(rmGM-CSF+rmIL-4培养6d)、mDC组(rmGM-CSF+rmIL-4培养6d+LPS培养2d)、10-DC组(rmGM-CSF+rmIL-4+rmIL-10培养6d)、T-DC组(rmGM-CSF+rmIL-4+rhTGFβ1培养6d)、10T-DC组(rmGM-CSF+rmIL-4+rmIL-10+rhTGFβ1培养6d).观察各组细胞形态、鉴定细胞表面标记CD11c、MHCⅡ、CD80、CD86、检测细胞IL-12和CCR7的mRNA表达以及培养上清中IL-10和TGF-B的含量.
结果及结论:(1)rmGM-CSF、rmIL-4、rmIL-10、rhTGFβ1联合诱导的tDCs加入CD41共培养后具有GPIIb特异性并且具有较好的耐受表型;(2)将GPIIb特异性10T-DC输注入ITP小鼠体内后,其可迁移到小鼠脾内发挥作用,提高血小板的数目同时降低体内的免疫应答。