利用重组大肠杆菌生产L-赖氨酸

来源 :中国生物工程学会2014年学术年会暨全国生物技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Youmi8787
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L-赖氨酸是唯一带有侧链伯氨基的氨基酸,也是哺乳动物的必需氨基酸和生酮氨基酸.由于谷物食品中的赖氨酸含量极低,且在加工过程中易被破坏,故被称为第一限制性氨基酸,被广泛地应用于医药制造、食品和饲料添加剂等领域.目前,L-赖氨酸工业上主要以直接发酵法进行生产,它是以葡萄糖、甘蔗糖蜜等廉价原料为碳源,利用优良的L-赖氨酸生产菌种生产L-赖氨酸.其中,大肠杆菌作为一种典型的模式微生物,具有遗传操作简单、生长周期短等优点,因而被广泛的应用于L-赖氨酸的合成.在本研究中,以大肠杆菌K-12系列的MG1655为出发菌株,针对L-赖氨酸合成的限制性因素,对其进行了一系列代谢工程改造。首先敲除了编码赖氨酸脱羧酶的cadA和ldcC基因,提高了细胞内L-赖氨酸的积累。接下来通过定点突变解除了L-赖氨酸对编码天冬氨酸激酶的lysC基因和编码二氢吡啶甲酸合酶的dapA基因的反馈抑制,并对突变后的基因进行了过量表达,使得大肠杆菌的L-赖氨酸产量提高到了1.5 g/L左右。
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