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目的: 比较甲醇燃料汽车尾气和汽油燃料汽车尾气对A549细胞株的细胞毒性及增殖和凋亡功能的影响。
方法:
1)MTT比色法检测受试物细胞毒性。
2)受试物体外培养试验:汽油组剂量分组为0.125 L/ml,0.062 5 L/ml,0.031 25L/ml,0.0156 L/ml,0.0078 L/ml和一个空白对照;甲醇组剂量分组与汽油相同。A.细胞培养介质乳酸脱氢酶活性的测定:B.细胞形态学观察;C.流式细胞术,a.检测细胞周期并计算细胞增殖指数,b.观察细胞亚二倍体峰的变化,计算凋亡百分比.
结果:
1)MTT比色法:汽油组在0.125L/ml剂量组OD值与对照组相比具有显著性差异(P<0.05);甲醇组在IL/ml剂量组OD值与对照组相比具有显著性差异(P<0.05);
2)受试物体外培养试验:A.细胞培养介质乳酸脱氢酶活性的测定:汽油组在0.062 5-0.125L/ml各剂量组LDH值与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),同等剂量下甲醇组与对照组相比,均无显著性差异(P>0.05);B.细胞形态学观察:汽油组在0.125L/ml,可见大量死亡细胞和凋亡细胞数增加,相同剂量甲醇组未见明显改变;C.流式细胞术:仅汽油组0.0156,0.031 25,0.0625L/ml剂量组细胞增殖指数显著低于对照组(p<0.05),汽油组和甲醇组在0.0156-0.062 5L/ml剂量组凋亡百分比均高于对照组,但后者作用更强。
结论: 在同等剂量下,汽油燃料尾气对A549细胞株的毒性及对细胞增殖的抑制明显高于甲醇,但甲醇诱导A549细胞凋亡的作用略强.