BLyS改组噬菌体文库的构建及初步筛选

来源 :第五届全国感染与免疫及生物制品学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Aslaen

【摘要】

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从质粒pT7474-BLyS及人胎脑cDNA文库中分别扩增出BLyS和APRIL基因,用DNaseⅠ消化后,回收小于 50 bp的片断,用于DNA改组.PCR产物与噬菌体载体pfUSE5连接后,电转E.coli ER2738

【作者】

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沈琼宋聿文袁勤生韩威丁艳丽龚毅

【机构】

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华东理工大学,生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237

【出处】

：

第五届全国感染与免疫及生物制品学术研讨会

【发表日期】

：

2006年期

【关键词】

：

改组文库噬菌体文库构建受体结合活性降低蛋白结构人胎脑库容量质粒载体筛选连接扩增克隆基因基础功能

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从质粒pT7474-BLyS及人胎脑cDNA文库中分别扩增出BLyS和APRIL基因,用DNaseⅠ消化后,回收小于 50 bp的片断,用于DNA改组.PCR产物与噬菌体载体pfUSE5连接后,电转E.coli ER2738获得改组文库.构建的改组文库库容量为8.9×105.对文库进行初步的筛选,获得了一个受体结合活性降低的突变克隆.成功构建了BLyS改组噬菌体文库,为蛋白结构与功能之间关系的深入研究打下了基础.

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