目的 在乳腺癌发生复发转移时表现为病情的进展,而此时毒热壅盛是其进展期常见证型之一,同时也是肿瘤内部炎症微环境的外在表现,此时当以清热解毒法来治疗.复方苦参注射液是常用的具有清热解毒功效的中药注射液,我们采用其作为干预手段,以肿瘤炎症微环境中的重要间质细胞骨髓间充质干细胞为研究对象,以调控乳腺癌细胞交互作用的趋化因子轴线及其下游基因的激活情况为目的,观察苦参注射液对骨髓间充质干细胞促乳腺癌恶性行为的干预作用.方法 1.我们通过文献综述,选择差速贴壁发来从SD大鼠骨髓中获取了骨髓间充质干细胞,通过生长曲线、诱导成骨和成脂分化、流式细胞术鉴别细胞表型来对细胞进行了鉴定和比较,最终认为SD大鼠的骨髓间充质干细胞具有较好的细胞活性和多能性,选择其为下一步实验的细胞来源.2.通过肿瘤条件培养液来模拟肿瘤炎性微环境,观察骨髓间充质干细胞在肿瘤微环境中表型的变化.3.以BMSCs与乳腺癌4T1细胞交互作用的重要趋化因子轴线SDF-1/CXCR4为观察靶点,在体外分别采用单独干预和Transwell共培养体系来观察在两者交互作用时SDF-1/CXCR4动态变化.4.采用Transwell共培养体系观察共培养情况下,BMSCs对乳腺癌4T1细胞系的增殖的影响,采用Transwell迁徙小室来观察；条件培养液和共培养情况下,BMSCs及4T1细胞相互迁移情况,采用Transwell侵袭小室来观察,条件培养液和共培养情况下,4T1乳腺癌细胞侵袭能力的变化.结论 通过比较复方苦参注射液对正常骨髓间充质细胞和乳腺癌4T1细胞在抑制率、诱导凋亡和细胞周期影响的差异性,最终发现在具有抑制肿瘤细胞和诱导凋亡的相同浓度下,复方苦参注射液对正常的骨髓间充质干细胞并未表现出明显影响,提示具有此特性的复方苦参注射液是理想的长期干预药物.同时和化疗药DDP的对比也提示我们,复方苦参注射液在低浓度的干预条件下可能并不是完全通过对肿瘤的直接抑制而起到抗复发转移的作用.在肿瘤微环境情况下,骨髓间充质干细胞的表型发生了变化,免疫荧光结果显示其特异性蛋白表达量和强度随着时间不断增强.采用复方苦参注射液干预后发现,可抑制骨髓间充质干细胞向肿瘤相关成纤维细胞表型的变化.不同浓度苦参注射液干预后,其均可降低乳腺癌4T1细胞表面CXCR4受体的表达,同时在低氧环境下骨髓间充质干细胞促乳腺癌4T1细胞增殖能力强于常氧环境,低氧环境下骨髓间充质干细胞向乳腺癌4T1细胞的迁移能力较常氧环境增加.苦参对以上环节均有一定的抑制作用.同时发现在低氧共培养48h条件下,复方苦参注射液可明显降低细胞共培养上清中的SDF-1的浓度,并影响两者细胞之间的互相迁移.