【摘 要】
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目的:探讨补肾益髓生血法60Co-γ射线和环磷酰胺AA大鼠含药血清对大鼠骨髓造血祖细胞增殖分化与基因表达的影响.方法:联合60Co-γ射线和环磷酰胺建立AA大鼠模型,以补肾益髓
【机 构】
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北京中医药大学,北京 100029
【出 处】
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第十一次中国中西医结合实验医学学术研讨会
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目的:探讨补肾益髓生血法60Co-γ射线和环磷酰胺AA大鼠含药血清对大鼠骨髓造血祖细胞增殖分化与基因表达的影响.方法:联合60Co-γ射线和环磷酰胺建立AA大鼠模型,以补肾益髓生血法复方中药灌胃大鼠14天,制各大鼠含药血清,采用密度梯度法分离正常大鼠骨髓单个核细胞(BM-MNC),采用甲基纤维素半固体法培养造血祖细胞,在红系及粒系培养体系中加入各个组别含药血清,培养体系中含药血清比例为20%,分为空白对照组(30%胎牛血清)、正常对照组、模型组、西药组、益髓生血组、温肾生血组和滋肾生血组.于第3~4天检测造血祖细胞红细胞集落形成单位(CFU-E)、第7~10天检测粒细胞巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)和红系爆式形成单位(BFU-E)数目;收集集落细胞,RT-PCR检测红系特异性转录因子GATA-1mRNA及粒系特异性转录因子PU.1mRNA的表达水平.结果:与正常对照组比,模型组造血祖细胞CFU-E、BFU-E和CFU-GM数目均明显降低(P<0.01),红系细胞GATA-1 mRNA、粒系细胞PU.1 mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组比,各个治疗组均能造血祖细胞CFU-E、BFU-E和CFU-GM数目(P<0.01);滋肾生血组对CFU-E数目的提升明显优于益髓生血组(P<0.01);滋肾生血组对CFU-GM数目的提升优于益髓生血组、温肾生血组,无统计学差异;各治疗组红系细胞GATA-1mRNA、粒系细胞PU.1mRNA表达高于模型组(P<0.01);滋肾生血组GATA-1 mRNA表达明显优于益髓生血组、温肾生血组(P<0.05);滋肾生血组PU.1 mRNA表达高于益髓生血组、温肾生血组,无统计学差异.结论:补肾益髓生血法再障大鼠含药血清能够促进正常大鼠骨髓CFU-E、BFU-E和CFU-GM集落的形成,并增加GATA-1mRNA、PU.1mRNA的表达,促进骨髓造血祖细胞增殖分化;滋肾生血组对骨髓造血的促进能力优于益髓生血组、温肾生血组,尤其表现为促进红系造血.
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