【摘 要】
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目的：观察健脾活骨方(HG)不同提取部位对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨以及成脂分化的影响,并探讨其可能的机制.方法：分离培养大鼠MSCs,分别在成骨、成脂诱导分
【机 构】
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中国中医科学院中药研究所,北京100700
【出 处】
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中国中医药研究促进会骨伤科分会2016年学术年会
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目的：观察健脾活骨方(HG)不同提取部位对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨以及成脂分化的影响,并探讨其可能的机制.方法：分离培养大鼠MSCs,分别在成骨、成脂诱导分化的同时,给予HG 水部位(HGA)、乙酸乙酯部位(HGE)、氯仿部位和正丁醇部位后,经ALP 染色检测碱性磷酸酶的活性,油红O 染色检测脂肪细胞的形成；ELISA 方法检测上清液中BMP2 和β-catenin 含量,realtime-PCR 和western 方法检测成骨标志因子以及成脂分化标志因子的表达.结果：HG 不同提取部位均能不同程度促进MSCs 的成骨分化、抑制成脂分化,其中HGA 促成骨作用最强,而HGE 抑成脂作用最佳.HGA 可以剂量依赖性促进BMP2 和β-catenin 的分泌,提高LP、Runx2、BMP2、Osx 和OCN 的mRNA 以及蛋白水平,DKK-1(Wnt 的抑制剂)和Noggin(BMP 的抑制剂)可阻止上述HGA 作用；HGE 可显著抑制PPARγ、LPL 和AP2 的表达,DKK-1可逆转其作用,相反Noggin 可加强HGE 上述作用.结论：HGA 促MSCs 成骨分化作用最强,HGE 抑制脂肪细胞形成作用最佳,有效调控Wnt 和BMP 信号通路是HG 发挥促成骨和抑成脂作用的可能机制.
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