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根据GenBank上发表的贝氏贝诺孢子虫核糖体内转录间隔区(ITS)序列,在传统PCR方法的基础上设计一对特异性内引物,建立贝氏贝诺孢子虫巢氏PCR检测方法并进行了临床样品检测.结果表明,建立的巢式PCR检测方法能检测到贝氏贝诺孢子虫DNA的最低浓度为24.3 ag/μL,检测刚地弓形虫、犬新孢子虫、牛巴贝斯虫、环形泰勒虫、边缘无浆体等病原体均为阴性,196份临床检测样本发现,3份为阳性,阳性率为1.53%.因此可见,本研究所建立的巢氏PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,可用于牛贝诺孢子虫病的诊断.