【摘 要】
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近年来研究表明血蓝蛋白是一种多功能蛋白,尤其是血蓝蛋白及其降解片段具有酚氧化物酶、抗病毒和抗细菌等多种免疫学活性.但迄今为止,其凝集活性及其作用机理等尚不清楚.本研
【机 构】
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汕头大学理学院生物学系,广东,汕头,515063
【出 处】
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2006全国海洋生物技术与海洋药物学术会议暨全国第九届海洋药物学术研讨会
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近年来研究表明血蓝蛋白是一种多功能蛋白,尤其是血蓝蛋白及其降解片段具有酚氧化物酶、抗病毒和抗细菌等多种免疫学活性.但迄今为止,其凝集活性及其作用机理等尚不清楚.本研究以凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei为研究对象,运用亲和层析、SDS-PAGE、细菌凝集实验、细菌凝集抑制实验、生物信息学、基因克隆与表达等方法探索血蓝蛋白的凝集活性及其作用机理.结果发现,血蓝蛋白对大肠杆菌Escherichia coli、副溶血弧菌Vibrio parahaemolyticus、溶藻酸弧菌Vibrioalginolyticus、河弧菌Vibrio fluvialis、哈维氏弧菌Vibrio harveyi和嗜水气单胞菌Aeromona hydrophila等6种细菌具有凝集活性(凝集活性大小为0.27～1.08 mg/L),其凝集活性可被N-乙酰神经氨酸所全部抑制.在此基础之上,选用大肠杆菌外膜蛋白和血蓝蛋白亚克隆重组表达蛋白进一步探索血蓝蛋白凝集活性机理.结果显示,大肠杆菌外膜蛋白可明显抑制血蓝蛋白凝集反应,同时含血蓝蛋白Ig-like区的原核表达蛋白具有凝集活性,而不含Ig-like区的原核表达蛋白则无凝集活性.由此推测,血蓝蛋白确实具有凝集活性,其凝集反应机制可能是血蓝蛋白通过其Ig-like区与细菌外膜蛋白相互作用的结果,对进一步研究血蓝蛋白的非特异性免疫机理具有重要意义.
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