【摘 要】
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目的:应用RNA干扰技术,沉默胃癌MKN-45细胞的c-Met基因,从基因和蛋白两个水平观察转染前后胃癌MKN-45细胞c-Met及其下游P13K/Akt信号分子表达的变化,为胃癌的基因靶向治疗提
【出 处】
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第十五届全国临床肿瘤学大会暨2012年CSCO学术年会
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目的:应用RNA干扰技术,沉默胃癌MKN-45细胞的c-Met基因,从基因和蛋白两个水平观察转染前后胃癌MKN-45细胞c-Met及其下游P13K/Akt信号分子表达的变化,为胃癌的基因靶向治疗提供理论依据.方法:设计并合成3条c-Met-siRNA序列,通过脂质体LipofectaminTM2000介导,将3条c-Met-siRNA序列转入胃癌MKN-45细胞中.转染48h后,从基因和蛋白水平,利用实时定量PCR(RT-PCR)方法和Western-Blot方法,检测转染前后胃癌MKN-45细胞c-Met及下游信号分子表达的变化.结果:沉默c-Met基因后RT PCR方法检测转染后胃癌MKN-45细胞c-Met基因的表达较未转染组明显下降(P<0.05)，而PI3k基因和AKT基因的表达较未转染组无明显下降(P>0.05)。Western-Blot方法检测转染后胃癌MKN-45细胞c-Met蛋白、p-PI3k蛋白和p-AKT蛋白的表达较未转染组明显下降(P<0.05)，而PI3k蛋白和AKT蛋白的表达较未转染组无明显下降(P>0.05)。结论:三条c-Met-siRNA有效地沉默胃癌MKN-45细胞c-Met基因，减少c-MetmRNA及c-Met蛋白的表达。沉默胃癌MKN-45细胞c-Met基因后，减少了下游PI3k/AKT信号通路磷酸化信号分子的数量，对非磷酸化分子的表达无明显的影响。
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