猪六种病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用

来源 :2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanyushan10601
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究针对六种病毒的保守基因设计了特异性引物,建立能够同对检测猪六种常见病毒感染的多重PCR方法并初步应用于临床样品的检测。猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、日本脑炎病毒(JEV)是引起猪繁殖障碍性疾病的重要病原,给养猪业造成了严重的经济损失.由于六种病毒常呈混合感染,增加了临床快速诊断的难度。目前,常规的诊断方法如病毒分离、血清学诊断方法等存在着耗时长、敏感度低的缺陷,己不能满足现实临床诊断需要。多重PCR方法具有敏感性高且可以一次检测多种病原的优势,更适于混合感染的快速诊断。
其他文献
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea virus,BVDV)属黄病毒科,瘟病毒属.BVDV感染家畜后引起腹泻、流产、呼吸道疾病和免疫机能障碍,给畜牧业造成了巨大的经济损失.然而,目前还没有控制BVDV的有效措施.本研究通过RNAi和体细胞核移植技术制备整合有靶向BVDV基因组shRNA的转基因胚胎和胎儿,探讨RNAi防治BVDV疾病及培育抗BVDV家畜动物的可行性.前期研
利用噬菌体展示技术进行多肽筛选的实质是一个蛋白互作的过程,1990年McCafferty等报道了用噬菌体展示技术筛选溶菌酶单链抗体的方法,使得这项技术被更加广泛的应用.本实验利用噬菌体展示技术筛选出42株阳性环7肽噬菌体,对其DNA序列进行Basic BLAST、DNAMAN及NCBI protein blast分析筛选出与布鲁氏菌OMP25蛋白亲和结合很强的5个多肽和一个潜在的OMP25蛋白结合
研究羊种布鲁氏菌糖基转移酶(WboA)在诱发胚胎滋养层细胞炎症反应中的作用.研究表明WboA蛋白具有细胞毒作用,布鲁氏菌的致炎作用与脂多糖O链相关,为进一步阐明布鲁氏菌感染宿主细胞的发病机制奠定了基础.布鲁氏菌是兼性胞内寄生菌,胚胎滋养层细胞是布鲁氏菌侵染的靶细胞。胚胎滋养层细胞受到损伤会引发强烈的炎症反应,影响胎儿向母体的植入,容易引发母畜流产。布鲁氏菌LPS是一种毒力因子,已被初步证明与引发母
作为高氟对雏鸡盲肠扁桃体研究的一部分,本文通过对盲肠扁桃体组织悬液中细胞因子含量的检测,以此衡量盲肠扁桃体免疫功能的变化,为进一步研究氟的免疫毒性提供数据参考及动物模型.细胞因子是由多种细胞产生的可溶性蛋白与多肽的总称。有报道称氟可以诱导IL-6和IL-8在人类肺脏上皮细胞的合成,阐明了氟可影响细胞因子的合成和分泌。本研究中,高氟引起TNF-α,IFN-γ,IL-4和IL-6的含量均下降。免疫学上
目前,关于氟对畜禽肠道免疫功能的研究未见系统报道.而盲肠扁桃体作为黏膜免疫系统的重要组成部分之一,在黏膜免疫系统中发挥着重要且独特的作用.有鉴于此,本试验选用1日龄艾维茵(AA)肉鸡健雏,饲以梯度剂量的高氟日粮,通过对盲肠扁桃体抗氧化功能的检测,以此衡量盲肠扁桃体的变化,为进一步研究氟的免疫毒性提供数据参考及动物模型.氧自由基反应和脂质过氧化反应在机体的新陈代谢过程中起着重要的作用,正常情况下两者
黄曲霉素对动物有强致癌作用,同时影响动物的免疫功能.硒作为动物的必须微量元素,在抗肿瘤及免疫调节等方面均具有重要作用.目前,国内外还未见日粮中添加梯度剂量亚硒酸钠对黄曲霉素B1中毒雏鸡外周血T淋巴细胞亚群及血清IL-2、IFN-γ含量的影响的研究.本实验通过添加梯度剂量的亚硒酸钠,研究其对AFB1中毒雏鸡外周血T-淋巴细胞亚群及血清IL-2、IFN-γ含量的影响,以探讨日粮亚硒酸钠对AFB1所致免
黄曲霉毒素B1是霉菌毒素中最常见和生物活性最强的一种,摄入AFB1可使畜禽免疫功能受到抑制,生长性能降低,肝肾功能受损,长期摄入可致肝癌.迄今尚未见不同浓度的AFB1对雏鸡胸腺细胞凋亡影响的研究.本研究用含不同浓度AFB1的日粮饲喂雏鸡,研究AFB1对胸腺细胞凋亡的影响,探讨AFB1致雏鸡免疫抑制的损伤机理.结果表明,当日粮中AFB1含量超过0.3 mg/kg时,雏鸡胸腺细胞的凋亡率增加。AFB1
目前,关于钒对黏膜免疫功能的影响未见系统报道.盲肠扁桃体作为黏膜免疫系统的重要组成部分之一,在黏膜免疫系统中发挥着重要且独特的作用.本实验在日粮中添加不同水平的钒,通过对雏鸡盲肠扁桃体IgA+细胞数量的测定以及细胞因子含量变化的测定,衡量机体黏膜免疫功能的变化.同时,为钒对肠道黏膜免疫功能的影响提供新的实验室依据以探讨其影响机理.IgA是肠道黏膜免疫的主要效应因子,而IgA分泌细胞数量的变化已成为
作为高氟对雏鸡盲肠扁桃体研究的一部分,本文通过对盲肠扁桃体T淋巴细胞亚群和IL-2含量的检测,以此衡量机体细胞免疫的变化,为进一步研究氟的免疫毒性提供数据参考及动物模型.在盲肠扁桃体中,有35%的淋巴细胞属于T细胞,均匀的分布于盲肠扁桃体的黏膜层,参与抗体的产生和调节机体的细胞免疫功能。与哺乳动物类似,禽类的T细胞可以根据表面蛋白分成几个亚群。CD3+分子是成熟T细胞的表面标记。表达CD4+CD8
目前,关于钒对黏膜免疫功能的影响未见系统报道.盲肠扁桃体作为黏膜免疫系统的重要组成部分之一,在黏膜免疫系统中发挥着重要且独特的作用.本实验在日粮中添加不同水平的钒,通过对盲肠扁桃体病理变化的研究、IL-2含量的测定以及T-cell亚群比例变化的测定,衡量机体黏膜免疫功能的变化.同时,为钒对肠道黏膜免疫功能的影响提供新的实验室依据以探讨其影响机理.在禽类中,CD4+T细胞被认为是作为辅助炎性T细胞而