【摘 要】
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目的：本实验通过检测β-榄香烯对肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用和细胞周期阻滞，以及对PI3K/Akt, Erkl/2, Cbl-b, c-Cbl蛋白表达的影响，探讨其作用机制。方法：1、细胞培养常规
【机 构】
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中国医科大学附属一院呼吸疾病研究所 110001
【出 处】
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2011中华医学会呼吸病学年会暨第十二次全国呼吸病学学术会议
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目的：本实验通过检测β-榄香烯对肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用和细胞周期阻滞，以及对PI3K/Akt, Erkl/2, Cbl-b, c-Cbl蛋白表达的影响，探讨其作用机制。方法：1、细胞培养常规细胞传代培养，取对数生长期细胞常规消化制成单细胞悬液，调整细胞密度为2. 5 X 107/L，接种于100m1培养瓶中，每瓶5m1，在37°C, 5%C02培养箱中培养24h待细胞贴壁，0. 25%胰酶消化液消化传代，2-3d传代1次。2、噻唑蓝比色法(MTT法)检测a-榄香烯对肺A549细胞增殖抑制作用。3、流式细胞术检测细胞凋亡。4、Western blot检测蛋白表达变化。5、加入PI3K/Akt抑制剂(Ly294002) 25uM及Erkl/2 (PD98059) 20uM处理及细胞周期检测。结果：加入PI3K/Akt抑制剂(Ly294002)及Erkl/2 (PD98059)与β-榄香稀协同诱导凋亡结果显示对照组亚G1期细胞百分数为1. 2%，经40ug/ml(β-榄香烯处理后，细胞周期检测结果显示亚G1期细胞百分数8.1%. Ly294002预处理后亚G1期细胞百分数9.0%, PD98059预处理后亚G1期细胞百分数5. 8%,Ly294002与β-榄香烯40ug/ml共同处理后亚G1期细胞百分数28. 8%, PD98059与β-榄香烯40ug1m1共同处理后亚G1期细胞百分数29. I%，与40ug/mlβ-榄香烯处理组有显著差别。可见Ly294002与PD98059协同β-榄香烯诱导凋亡。结论：β-榄香烯对肺腺癌A549细胞有增殖抑制作用，可通过抑制PI3K/Akt, Erkl/2诱导肺A549细胞凋亡，并伴随Cbl-b, c-Cbl的表达上调。
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