CatL对猪肺炎支原体感染后黏膜免疫应答机制的初步研究

来源 :2016全国兽医学博士生论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:monorrch
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  本研究将Mhp ATCC25095株感染健康仔猪,建立猪肺炎支原体动物模型.外源重组表达的CatL,将其与Mhp一起气管注入健康仔猪,然后分别于感染后3天、14天、21天、28天剖检,检测呼吸道中SIgA分泌量与Mhp活菌数,各免疫细胞中CatL表达量,分析SIgA与Mhp的相关性、CarL与SIgA的相关性,CarL与Mhp的相关性.采用CRISPR-Cas9系统敲除猪肺泡巨噬细胞(PAM)中CatL基因,建立基因缺失细胞株,将Mhp体外感染PAM及CarL缺失型PAM细胞,分别于3h、6h、12h、24h、48h收集细胞,通过实时荧光定量PCR方法检测抗原递呈相关分子SLA-DR、SLA-DM、Ii、CD40、CD80、CD86的mRNA表达动态,同时检测SIgA分泌量.结果 表明,Mhp感染后仔猪出现发烧、喘、流鼻涕的症状,剖检可见肺脏有出血、坏死现象;而注入重组CatL后,仔猪仅在Mhp感染后前3天出现症状,后期恢复正常.CarL保护组的鼻拭子及支气管肺泡灌洗液(BALF)中Mhp活菌数比Mhp感染组低,且在第21天活菌数最低,为105CFU/ml;两组的SIgA分泌量均逐渐升高,但CarL保护组比Mhp感染组高,可见SIgA在Mhp感染后起到了主要的免疫应答,CarL对Mhp感染起到保护作用.Mhp体外感染PAM后,各抗原递呈相关分子水平均下降,体外感染CatL缺失型PAM后,各分子水平下降比对照组高,可见CatL参与到Mhp感染后的抗原递呈作用.
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