【摘 要】
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目的：建立HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中R、S-华法林的含量,并对临床142例患者进行检测,分析CYP2C19*2基因多态性对血药浓度的影响.方法：血浆样品以卡马西平为内标,经二氯甲烷提取后HPLC-MS/MS分离、分析.色谱系统:Astec chirobiotic V(250×2.1mm,5μm)为色谱柱,柱温:25℃;流动相:0.02％甲酸水溶液∶甲醇(55∶45,V/V);流速:0.
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目的：建立HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中R、S-华法林的含量,并对临床142例患者进行检测,分析CYP2C19*2基因多态性对血药浓度的影响.
方法：血浆样品以卡马西平为内标,经二氯甲烷提取后HPLC-MS/MS分离、分析.色谱系统:Astec chirobiotic V(250×2.1mm,5μm)为色谱柱,柱温:25℃;流动相:0.02％甲酸水溶液∶甲醇(55∶45,V/V);流速:0.2mL·min-1.质谱检测方式:MRM.质荷比:华法林307＞161.18,卡马西平:237.31＞194;锥孔电压分别为50V与40V,碰撞能量均为20V.以PCR扩增后,芯片杂交法进行基因分析CYP2C19基因型.ANOVA方差分析基因型与不同对映体血药浓度的关系.
结果：R-华法林在4.3～1040μg·L-1,S-华法林在4.8～1144μg·L-1浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9989和0.9962(n=8).R-华法林回收率在97.70～101.1％,RSD＜4.63％;S-华法林回收率在98.24～101.4％,RSD＜3.99％(n=5).日内和日间RSD＜6.96％(n=5).R、S-华法林的最低检测限分别为1.0μg·L-1和1.5μg·L-1(S/N≥3).135例患者R、S-华法林浓度分别为609.26±513.36μg·L-1和287,76±252.63μg·L-1,CYP2C19*2不同遗传背景患者的R、S-华法林及其比值均无显著差异,p值分别为0.117,0.385和0.788.
结论：本法简便、准确、灵敏度高,重现性好,适于生物样品华法林光学异构体的药物分析,CYP2C19*2的多态性对R、S-华法林血药浓度影响不显著.
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