【摘 要】
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为了获得功能性凝结芽孢杆菌并研究其发酵条件,本实验从洛阳周边采集不同动物的粪便样品25份.首先对样品用无菌水进行稀释处理,加热80℃10分钟后取上清液少许接种于改良M
【机 构】
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河南省动物疫病与公共安全院士工作站,洛阳,471003
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第十一次全国学术研讨会暨第五届会员代表大会
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为了获得功能性凝结芽孢杆菌并研究其发酵条件,本实验从洛阳周边采集不同动物的粪便样品25份.首先对样品用无菌水进行稀释处理,加热80℃10分钟后取上清液少许接种于改良MRS培养基平板,待菌落长出后挑取疑似菌落进行革兰氏染色镜检,然后进行生理生化试验鉴定和16S rDNA序列测定鉴定.对分离出的菌株,以培养基单因素试验的基础上做7因素2水平正交试验,从而得出优化后的发酵条件和芽孢形成条件.试验结果表明从55株菌株中分离出一株性能优良的菌株B.C12,革兰氏阳性,杆状,芽孢端生.16S rDNA序列分析表明,与凝结芽孢杆菌的16S rDNA序列同源性99.3％,因此确定该菌株为凝结芽孢杆菌.芽孢形成条件的优化结果表明,优化后的培养基为酵母粉3g/L,蛋白胨5g/L,牛肉膏2g/L,MnSO40.005 g/L,NaCl 2g/L,K2HPO43 g/L,MgSO40.02 g/L.最优的培养条件：温度40℃,初始pH值为7.0,转速210r/min,装液量为250 mL的三角瓶装30 mL,接种量为6％ (v/v),发酵时间为48 h.在此条件下菌液浓度可达9.26× 109CFU/mL,芽孢转化率达到96％以上.该试验的结果可以为凝结芽孢杆菌的实际应用提供基本依据,优化的培养基及培养条件可以为工业化发酵提供参考.
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