彗星实验(SCGE)检测洛克沙胂对蚯蚓和鲫鱼细胞DNA损伤的研究

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(目的)本文以土壤蚯蚓和池塘鲫鱼为指示生物,探讨了洛克沙胂暴露胁迫对蚯蚓体腔细胞和鲫鱼肝脏细胞DNA损伤的影响情况,为洛克沙胂环境暴露的生态毒性效应评价与风险评估提供依据。(方法)1.以赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)为土壤指示生物,在室内土壤模拟环境中设洛克沙胂浓度组20mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg(以As计)和空白组;2.以鲫鱼为水体环境指示生物,设洛克沙胂50μg/L、150μg/L、300μg/L、500μg/L(以As计)浓度组和空白组,每组为15尾鲫鱼,蚯蚓和鲫鱼均分别于暴露第7、14、21 d采样,采用单细胞凝胶电泳技术(彗星实验)进行了洛克沙胂对蚯蚓体腔细胞和鲫鱼肝细胞DNA损伤的遗传毒性试验,应用CASP软件分析彗星尾部DNA百分含量、彗星尾部长度和Olive尾距等指标,导入统计分析软件SPSS17.0进行分析,对洛克沙胂与DNA损伤之间的时间与剂量依赖关系进行了探讨。(结果)结果表明:1.蚯蚓连续7 d、14 d和21 d暴露于20mg/kg~200 mg/kg洛克沙胂中均能引起蚯蚓体腔细胞出现明显的DNA损伤,与空白对照组比较呈显著性差异(P<0.05),在暴露第21d后,在20 mg/kg~200 mg/kg浓度范围内出现明显的剂量-效应关系,并且随着暴露时间的延长,100mg/kg和200 mg/kg浓度的洛克沙胂对蚯蚓体腔细胞的损伤表现加重的趋势,呈现一定的时间-效应关系;2.在50μg/L~500μg/L暴露浓度中,洛克沙胂对鲫鱼肝细胞DNA可造成明显的损伤,与空白对照组相比呈极显著差异(P<0.01),在暴露第7天、14天后,50μg/L~500μg/L浓度范围内表现一定的剂量-效应关系,且随着暴露时间的延长,50μg/L、150μg/L和500μg/L浓度组洛克沙胂对鲫鱼肝细胞的损伤呈现加重的趋势,呈现一定的时间-效应关系。(结论)本文初步探讨了洛克沙胂对蚯蚓和鲫鱼的分子毒性效应,洛克沙胂可致使蚯蚓体腔细胞和鲫鱼肝细胞的DNA损伤,预示着洛克沙胂的环境暴露存在着潜在的遗传毒性效应,单细胞凝胶电泳技术可作为有机胂DNA损伤的有效检测手段。
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