【摘 要】
：
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,vp)是一种重要的水生动物来源的人畜共患的病原菌,能引起海水动物及人类严重的弧菌病.为了研究嗜中性粒细胞在Vp感染中的作用,我们将红色荧光蛋白(RFP)标记了一株致病菌Vp57,利用斑马鱼模型测试标记前后毒力变化及引起的疾病症状,并观察嗜中性粒细胞与Vp感染之间的动态过程.结果 显示细菌毒力在RFP标记前后没有变化,并能在宿主中引起相似的
【机 构】
：
上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海201306 上海海洋大学水产种质资源发掘
论文部分内容阅读
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,vp)是一种重要的水生动物来源的人畜共患的病原菌,能引起海水动物及人类严重的弧菌病.为了研究嗜中性粒细胞在Vp感染中的作用,我们将红色荧光蛋白(RFP)标记了一株致病菌Vp57,利用斑马鱼模型测试标记前后毒力变化及引起的疾病症状,并观察嗜中性粒细胞与Vp感染之间的动态过程.结果 显示细菌毒力在RFP标记前后没有变化,并能在宿主中引起相似的症状.用显微注射的方法感染3dpf的斑马鱼尾静脉,当注射579cfu/个体时,Vp57RFP通过血液循环进入到全身,注射1h后嗜中性粒细胞在感染部位增多,并在血液循环中清除部分细菌,3h后鱼死亡,体节处发现少量Vp57RFP；当注射974cfu个体时,2h后体节处也发现大量vp57RFP,2.5h后脊椎严重弯曲并死亡,推测脊椎弯曲和细菌毒性相关,嗜中性粒细胞的清除作用在感染后3h最明显.结果 表明斑马鱼是一个很好的研究先天免疫中嗜中性粒细胞和Vp57交互作用的模型.
其他文献
2012年,我们在中国养殖场的一批患早期死亡综合征/急性肝胰腺坏死症的中国明对虾中发现了一株黄头病毒(YHV)新株型,拟命名为YHV-8.本文建立了一种实时荧光一步RT-LAMP方法,此方法可以很好的用于检测YHV-1和YHV-8.本研究基于黄头病毒基因组的一段保守序列设计了6条特异性引物.优化后的LAMP体系中,包含8mM的Mg2+和1.SmM的dNTPs,在58℃反应60分钟.这个RT-LAM
本实验建立了一种提取鱼肠道微生物DNA的新方法(CLU),此方法高效,经济且简单.CLU法与氧化锆珠破壁法(ZBC)及Qiagen试剂盒(QIA)两种方法同时提取锦鲤肠道微生物DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳及16S rDNA高通量测序进行检测及比较.在方法CLU中,将溶菌酶与超声波结合分离基因组DNA,且首次将溶菌酶的孵育温度提高到60℃.琼脂糖凝胶电泳表明CLU法和QIA法可得到单一清晰的DNA条
为获取低温冻存贝类样本中感染牡蛎疱疹病毒(Ostreid herpesvirus 1,OsHV-1)的基因组序列,分析不同年代变异株基因组序列的变异情况.我们利用基于牡蛎疱疹病毒基因组长片段PCR扩增技术建立的基因组DNA高通量测序平台,使用Illumina Hiseq 2500 PE250,对2001年栉孔扇贝感染OsHV-1变异株的基因组进行高通量测序,并分析与其他年代已知OsHV-1变异株基
用含0％、1.0％复方中草药的饲料分别投喂初始体重为23.85±0.36g的吉富罗非鱼8周后，研究复方中草药对吉富罗非鱼生长和肌肉游离氨基酸组成的影响.结果 显示：饲料中添加1％的复方中草药能明显促进吉富罗非鱼生长，实验组罗非鱼的增重率比对照组提高了29.12％；饲料中添加1％的复方中草药能显著提高罗非鱼肌肉中游离氨基酸总含量(P＜0.05)，对四种呈味氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸)的
本文研究了在Cephodex微载体悬浮培养系统中规模化培养鲫脑组织细胞(GiCB)和鲤疱疹病毒Ⅱ型(Cyprinid herpesvirusⅡ,CyHV-2)的工艺.结果 表明,微载体Cephodex适合GiCB细胞的贴壁培养,细胞贴壁期培养基中血清浓度为10％,微载体浓度为6g/L；细胞初始接种密度为2.5×105 cells/ml时,以转速35r/min,每静置30min搅拌2min的间歇搅拌
由传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)感染导致的病毒病给我国鳜鱼养殖带来严重危害。为从全局角度探究ISKNV与宿主细胞的相互作用,本研究采用iTRAQ技术分析了ISKNV感染鳜鱼脑细胞(CPB)后24h和72h蛋白组,共获得6363个唯一肽段,其中2731个蛋白与已知蛋白同源。差异蛋白分析表明：24h感染组相对对照组共有232个差异蛋白,其中141个蛋白上调,91个蛋白下调；72h感染组相对对照组共有
本研究在克隆得到evpP上下臂的基础上,采用融合PCR方法获得了同源臂融合片段并构建了重组自杀质粒PDM4-△evpP.重组自杀质粒经结合转移和蔗糖复筛后获得evpP基因缺失突变菌株.EPC细胞的感染试验证实,evpP基因通过影响鮰爱德华菌的内化过程在鮰爱德华菌致病过程中发挥作用.
本文研究了有明显抑菌效果的5种中草药单方、6组复方对仿刺参的急性毒性作用及对仿刺参细菌性疾病的防治效果.结果 表明,5种单方中草药对仿刺参的毒性大小依次为：五倍子、乌梅、石榴皮、黄芩和甘草,且对仿刺参幼参的48小时半致死浓度分别为0.340,2.027,2.149,2.234和4.900g/L.6组复方药物中复方1(五倍子和甘草)毒性最大,复方4(五倍子和乌梅)的毒性最低.室内人工感染防治试验结果
细胞凋亡在许多生理过程和免疫应答中发挥着重要的作用,BOK基因是细胞凋亡中一个关键的调控因子。本研究对斜带石斑鱼BOK(Ec-BOK)基因进行了克隆及功能分析。结果 表明,Ec-BOK基因可以编码210个氨基酸,其含有4个保守的功能结构域(BH1-4)和1个跨膜区(TM),蛋白序列与深裂眶锯雀鲷该蛋白相似度最高,为97％。荧光定量分析表明Ec-BOK基因在多种组织中均有表达,其中肝脏和肾脏中表达量
斜带石斑鱼是一种重要的海水经济养殖鱼类,病害是制约水产养殖业的一个重要的因素.近年来,葡聚糖作为一种新型的天然免疫增强剂在水产养殖中得到广泛的应用.本文,我们使用腹腔注射法免疫斜带石斑鱼,在免疫后的6h和72h分别取头肾,淋巴细胞,胸腺和脾脏组织进行转录测序.转录组测序结果一共组装了175568条Unigene,平均长度是1507bp.通过Blast比对数据库进行功能注释,一共注释了121629条