【摘 要】
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目的：调控骨髓间充质干细胞(MSCs)的分化成为股骨头坏死治疗的重要靶点,观察健脾活骨方(HG)不同提取部位对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨以及成脂分化的影响,并探讨其可能的机制.方法：分离培养大鼠MSCs,分别在成骨、成脂诱导分化的同时,给予HG水部位(HGA)、乙酸乙酯部位(HGE)、氯仿部位和正丁醇部位后,经ALP染色检测碱性磷酸酶的活性,油红O染色检测脂肪细胞的形成;ELIS
【机 构】
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中国中医科学院中药研究所,北京100700 中国中医科学院望京医院,北京 100102
【出 处】
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中国中医药研究促进会骨伤科分会2016年学术年会
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目的：调控骨髓间充质干细胞(MSCs)的分化成为股骨头坏死治疗的重要靶点,观察健脾活骨方(HG)不同提取部位对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨以及成脂分化的影响,并探讨其可能的机制.
方法：分离培养大鼠MSCs,分别在成骨、成脂诱导分化的同时,给予HG水部位(HGA)、乙酸乙酯部位(HGE)、氯仿部位和正丁醇部位后,经ALP染色检测碱性磷酸酶的活性,油红O染色检测脂肪细胞的形成;ELISA方法检测上清液中BMP2和β-catenin含量,realtime-PCR和western方法检测成骨标志因子以及成脂分化标志因子的表达.
结果：HG不同提取部位均能不同程度促进MSCs的成骨分化、抑制成脂分化,其中HGA促成骨作用最强,而HGE抑成脂作用最佳.HGA可以剂量依赖性促进BMP2和β-catenin的分泌,提高LP、Runx2、BMP2、Osx和OCN的mRNA以及蛋白水平,DKK-1(Wnt的抑制剂)和Noggin(BMP的抑制剂)可阻止上述HGA作用;HGE可显著抑制PPARγ、LPL和AP2的表达,DKK-1可逆转其作用,相反Noggin可加强HGE上述作用.
结论：HGA促MSCs成骨分化作用最强,HGE抑制脂肪细胞形成作用最佳,有效调控Wnt和BMP信号通路是HG发挥促成骨和抑成脂作用的可能机制.
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