【摘 要】
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本文以辣椒为材料,采用回归分析的方法对RAPD体系进行优化,结果表明:采用20μl反应体系,Mg、dNTP、Taq酶、引物、模板DNA的浓度分别为3mmol、0.3mmol、1.3U、0.4mmol和64ng.在热循环程序为:94℃预变性2min,94℃变性30s,40℃退火1min,72℃延伸90s,47个循环,最后72℃延伸10min.通过对24个辣椒品种进行遗传多样性分析,证明该成化体系是稳
【机 构】
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南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室(南京);安徽技术师范学院(凤阳)
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本文以辣椒为材料,采用回归分析的方法对RAPD体系进行优化,结果表明:采用20μl反应体系,Mg<2+>、dNTP、Taq酶、引物、模板DNA的浓度分别为3mmol、0.3mmol、1.3U、0.4mmol和64ng.在热循环程序为:94℃预变性2min,94℃变性30s,40℃退火1min,72℃延伸90s,47个循环,最后72℃延伸10min.通过对24个辣椒品种进行遗传多样性分析,证明该成化体系是稳定可靠的.
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本文利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗根结线虫的Mi基因和抗番茄花叶病毒病的Tm基因紧密连锁的SCAR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段基本完全吻合,其中与Mi基因紧密连琐的SCAR1标记为共显性标记,抗感试材均产生750bp的特异片段,纯合和杂合抗病基因型存在TaqI酶切位点,酶切后分别产生了570bp、200bp和750bp、570bp、200bp的不同特异性片段,而
利用随机测序法,从结球甘蓝的cDNA文库中,分离到一个转录调控肿瘤蛋白基因类似物,命名为BoTCTP,该基因长828bp,包含一个504bp的完整开放编码框,编码168个氨基酸,在3端含有一个poly(A)尾巴.序列同源性比较发现,该基因与高等植物的TCTP基因有70﹪以上的同源性,其中与拟南芥的的TCTP基因的同源性最高,达到90.5﹪,而与动物,酵母的TCTP基因同源性较低.以BoTCTP为探
对基因分离方法、已经分离的基因和基因工程在蔬菜作物育种上的应用进行了综述,并讨论了基因工程育种存在的问题和应用背景.
利用青花菜(Brassica oleracea var.italica)与芥兰(Brassica oleracea var.alboglabra)杂交后代双单倍体(DH)群体为材料,通过AFLP技术构建了一个甘蓝类作物较高密度的遗传连锁图谱.该图谱包括9个主要连锁群主2个小连锁群,总图距801.5cM,含337个AFLP标记,标记间平均距离为3.6cM,为甘蓝类作物基因定位、比较基因组学及重要经济
从本院分离的病毒株系PMMV-QD提取RNA.自行设计、合成引物P1、P2,用RT-PCR扩增PMMV-QD CP的cDNA,插入T-载体克隆该片段,转化感受态受体菌XL1-Blue,用蓝白菌落筛选转化株,用PCR检测白色菌落,确认获得了带有cDNA的阳性重组子.测序和序列比对结果表明该片段确实含有PMMV的CP编码区,并且cDNA与已经报道的病毒株系核苷酸顺序的同源性达到97.7﹪.
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利用甘蓝显性雄性不育进行杂交制种时,找到纯合显性雄性不育基因的单株鉴定是利用甘蓝显性雄性不育进行杂交制种的技术关键,常规的测交鉴定方法费时、费事,影响了甘蓝显性雄性不育的推广和应用.本研究以03A、03B和03C三套不同甘蓝近等基因系为材料,通过对显性雄性不育多代回交后自交的后代中基因型分别为MsMs、Msms和msms单株的筛选,获得了多个能够鉴别甘蓝近等基因系显性纯合单株MSMS的AFLP标记