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目的：本实验利用白介素-1(IL-1)诱导培养的家兔椎间盘髓核细胞凋亡,用IGF-1对凋亡模型进行干预,探讨胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-1)对髓核细胞凋亡的抑制作用。
方法：从健康家兔取出椎间盘髓核,用Ⅱ型胶原酶消化法分离原代椎间盘髓核细胞后,单层培养并以胰酶消化法传代,采用差速贴壁法进行纯化.采用Ⅱ型胶原免疫组织化学染色、甲苯胺蓝染色等方法对髓核细胞进行鉴定。按空白组、IGF-1组(IGF-1、IL-1两种细胞因子共同作用)和IL-1组(仅IL-1因子作用)进行分组处理.利用光学显微镜、Giemsa染色、原位末端标记(TUNEL)技术进行观察,以Annexin-v/PI双染细胞后,用流式细胞仪测定的各组髓核细胞早期凋亡率作为凋亡检测指标。
结果：IL-1组光镜下可见大量髓核细胞凋亡,并可见典型的细胞凋亡形态学改变,IGF-1组可见少量细胞凋亡,空白组罕见凋亡征象.原位末端标记显示：与IL-1组比较,IGF-1组细胞凋亡率明显降低,差异有显著性(P＜0.01).流式细胞仪检测显示：与IL-1组比较,IGF-1组细胞凋亡率明显降低,差异有显著性(P＜0.01).IL-1组与空白组比较,凋亡率明显增高,差异有显著性(P＜0.01)。
结论：IGF-1对IL-1体外诱导的髓核细胞凋亡具有抑制作用。
方法：从健康家兔取出椎间盘髓核,用Ⅱ型胶原酶消化法分离原代椎间盘髓核细胞后,单层培养并以胰酶消化法传代,采用差速贴壁法进行纯化.采用Ⅱ型胶原免疫组织化学染色、甲苯胺蓝染色等方法对髓核细胞进行鉴定。按空白组、IGF-1组(IGF-1、IL-1两种细胞因子共同作用)和IL-1组(仅IL-1因子作用)进行分组处理.利用光学显微镜、Giemsa染色、原位末端标记(TUNEL)技术进行观察,以Annexin-v/PI双染细胞后,用流式细胞仪测定的各组髓核细胞早期凋亡率作为凋亡检测指标。
结果：IL-1组光镜下可见大量髓核细胞凋亡,并可见典型的细胞凋亡形态学改变,IGF-1组可见少量细胞凋亡,空白组罕见凋亡征象.原位末端标记显示：与IL-1组比较,IGF-1组细胞凋亡率明显降低,差异有显著性(P＜0.01).流式细胞仪检测显示：与IL-1组比较,IGF-1组细胞凋亡率明显降低,差异有显著性(P＜0.01).IL-1组与空白组比较,凋亡率明显增高,差异有显著性(P＜0.01)。
结论：IGF-1对IL-1体外诱导的髓核细胞凋亡具有抑制作用。