【摘 要】
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目的 观察微囊藻毒素-LR(microcystins-LR, MC-LR)对SD大鼠睾丸组织中SIRT1/p53途径凋亡相关蛋白表达的影响,探索白藜芦醇对SD大鼠生殖系统的保护效应.方法 将24只青春期SD雄鼠随机分为4组,分别为对照组、白藜芦醇组、MC-LR组和白藜芦醇+MC-LR组.连续14天对SD大鼠进行腹腔注射作用后,分离、提取SD大鼠睾丸组织.Western blot法检测各组SD大鼠睾
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目的 观察微囊藻毒素-LR(microcystins-LR, MC-LR)对SD大鼠睾丸组织中SIRT1/p53途径凋亡相关蛋白表达的影响,探索白藜芦醇对SD大鼠生殖系统的保护效应.方法 将24只青春期SD雄鼠随机分为4组,分别为对照组、白藜芦醇组、MC-LR组和白藜芦醇+MC-LR组.连续14天对SD大鼠进行腹腔注射作用后,分离、提取SD大鼠睾丸组织.Western blot法检测各组SD大鼠睾丸组织中SIRT1/p53途径凋亡相关蛋白的相对表达量,real time-PCR检测各组SD大鼠睾丸组织中SIRT1/p53途径凋亡相关因子在mRNA水平表达变化.采用免疫组化法来检测睾丸组织中SIRT1在各组的表达量的变化.结果 Western blot检测结果显示,单独MC-LR作用于SD大鼠后,睾丸组织中SIRT1蛋白相对表达量与对照组相比,明显减少,差异具有显著性(P＜0.05),而且乙酰化的p53及p53下游促凋亡蛋白有明显增加,同时伴有抑凋亡蛋白Bcl-2相对表达量显著降低.在对SD大鼠进行白藜芦醇预处理后,与单独MC-LR组相比,睾丸组织中SIRT1蛋白相对表达量有明显增加,并显著抑制乙酰化p53的相对表达及其下游促凋亡蛋白Bax等蛋白含量.同时免疫组化法检测睾丸组织SIRT1蛋白表达结果显示,单独MC-LR组与对照组相比,SIRT1相对表达量有明显降低,差异具有显著性(P＜0.05),但经白藜芦醇预处理之后,与单独MC-LR组相比,SIRT1含量又明显增加.而且,real time-PCR结果显示,在单独MC-LR组睾丸组织中SIRT1 mRNA表达与对照组相比有明显降低,p53及其下游促凋亡因子Bax等在mRNA水平有显著升高；但经白藜芦醇预处理后,与MC-LR组相比,SIRT1在mRNA水平表达有明显回升,同时伴有抑凋亡因子Bcl-2等表达增加,促凋亡因子Bax等在mRNA水平明显减少.结论 白藜芦醇可通过促进SIRT1表达来抑制MC-LR致SD大鼠睾丸组织凋亡.
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