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叶酸在人血浆中主要以5-甲基四氢叶酸形式存在.研究表明,叶酸除了与巨幼红细胞性贫血有关以外,还与神经管畸形、某些癌症、心脑血管疾病以及儿童智力低下有关.因此,快速、准确地测定人组织中的叶酸,对于预防、诊断和治疗由叶酸引起的疾病都有十分重要的意义.本实验使用Cleanert(R)PAX96孔板利用阴离子交换机理提取血清中的叶酸和5-甲基四氢叶酸。将1:1用水稀释的血清加入固相萃取板后，使用水和甲醇分别淋洗，再使用2％甲酸甲醇洗脱吹干复溶测试。整个操作配合使用Cleanert(R)M96生物样品前处理仪和Cleanert(R)V96氮气浓缩仪可同时处理96个样品，大大节约了样品处理时间提高了效率。测试结果表明在叶酸、5-甲基四氢叶酸加标浓度为1ng/mL-20ng/mL时回收率均大于89%，RSD(n=5)低浓度时不高于10.2%，高浓度时小于3.3%，叶酸、5-甲基四氢叶酸的最低定量浓度分别为0.05ng/mL、0.08ng/mL。通过后加标测得基质效应因子＜9%，可以满足临床检测研究的需要。