双端融合嗜热CBM9_2提高A.niger木聚糖酶稳定性

来源 :第十一届中国酶工程学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jsnjwh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
酶分子稳定性是长久以来人们关注的问题,相比引入二硫键、端部游离氨基酸去除、定点突变、端端序列替换,结合融合简单得多.碳水化合物结合结构域(CBM)是一种无催化活性结构域,源于海栖热袍菌TherrYiotogarYiaritirYia GHlO木聚糖酶的CBM9融合于黑曲霉A.niger GHl1木聚糖酶没有提高稳定性,拆分为较小的结构域Cl/C2融合于C-端,只有C2提高Xyn稳定性,而CI只提高其催化活性,将C2易位至N端,同样提高Xyn稳定性及催化活性,进而将C2融合N/C双端得到C2-Xyn-C2,50.
其他文献
目的:追踪一起肌肉注射引起臀部感染暴发事件的病原菌,并指导临床治疗.方法:首先对采集的标本进行细菌培养、分离、生化鉴定、PCR-直接测序法及基因芯片技术鉴定,然后选用14种抗生素采用K-B纸片法对检出的病原菌进行药敏试验.结果:采集的5份标本中均分离出非典型分枝杆菌,经生化鉴定、PCR直接测序法及基因芯片技术检测均为脓肿分枝杆菌.5株脓肿分枝杆菌对阿米卡星(AK)、亚胺培南(IPM)、头孢西丁(F
会议
目的:了解2009-2011年我院老年病房患者尿路感染病原菌的分布和耐药性变迁的特性,为临床合理使用抗菌药物提供科学依据.方法:采用法国生物梅里埃公司的VPI微生物自动鉴定系统,对医院2009年至201 1年,老年病房尿路感染住院患者的尿标本,进行细菌鉴定,并用K-B纸片法作药敏分析.结果:三年中,老年糖尿病科和老年康复科的患者尿路感染病原菌的阳性检出率较高,老年病房患者尿路感染病原菌以革兰阴性杆
会议
目的:建立一种基于高效毛细管振荡流PCR的微流控装置快速、准确检测NDM-1耐药菌.方法根据NDM-1的基因设计一对特异引物,对临床微生物检测的70株耐药肠道杆菌(厄它培南MIC≧2μg/ml)和55株鲍曼不动杆菌(亚胺培南MIC≧64 μg/ml)的细菌培养液进行高效毛细管振荡流PCR扩增,芯片电泳快速检测PCR产物.将阳性标本进行测序验证.同时阳性标本进行细菌培养及耐药检测.将阳性菌定量后细菌
会议
目的:目的检测PRDM1在结核病患者及正常人血液中表达量的差异.方法:采集17例结核病患者血液标本,20例健康体检者血液标本,分离外周血单个核细胞(PBMC),提取RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析PRDM1 mRNA的表达情况;利用SPSS17.0软件分析数据.结果:结核病患者组血液中的PRDM1相对表达量是健康体检组的1.997倍,两者之间有显著性差异(p=0.001).结
会议
目的:探讨HBV编码的preS2蛋白对人端粒酶逆转录酶启动子的激活作用。方法:PCR扩增人preS2基因,构建preS2与绿色荧光蛋白融合表达的载体pEGFP-preS2,共转染后通过荧光显微镜检测融合基因的表达。将pEGFP-preS2和人端粒酶逆转录酶全长启动子报告质粒pGL3B-TRTP共转染HepG2细胞,48h后裂解细胞,双荧光检测分析preS2对人端粒酶逆转录酶启动子的激活作用。结果:
会议
目的:探讨白介素18(IL-18)及IL-18受体(IL-18R)在免疫性血小板减少症(Idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者Th1类细胞因子优势应答中的价值.方法:应用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)检测15例急性期ITP患者和18例缓解期患者外周血单个
会议
目的:探讨IL-27在重型再生障碍性贫血(SAA)、中型再生障碍性贫血(MAA)中的表达及其与Th1、Th17亚群的关系.方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆IL-27、IFN-γ、IL-17水平;流式细胞仪测定外周血单个核细胞(PBMCs) Th1、Th17亚群比例;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测IL-27、IFN-γ、T-bet、IL-17、RORγ
会议
采用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)和厚涂片抗酸染色法分别检测216例结核患者的痰结核分枝杆菌((Mycobacterium Tuberculosis,MTB) DNA含量和厚涂片抗酸染色,并对结果进行对比分析.216例按厚涂片抗酸染色镜检视野分成6组,分别统计MTB-DNA监测结果,阳性率和测定值均以>10 1copy/ml.认为检测厚涂片抗酸染色和MTB-DNA,对临床结核分枝杆菌感染患
会议
目的:表达并纯化羊布鲁菌OMP22蛋白,制备其单克隆抗体(mAb).方法:采用GST亲和层析纯化的方法纯化OMP22蛋白.用灭活的羊布鲁菌M5株免疫小鼠,将小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,用纯化的OMP22蛋白ELISA间接法筛选阳性克隆,3次克隆化后建立杂交瘤细胞系.采用小鼠腹腔接种杂交瘤细胞制备腹水,正辛酸-硫酸铵法纯化mAb.采用Western-blot、ELISA以及表位相加试验等方
会议
葡萄糖醛酸是由葡萄糖的伯醇羟基被氧化成羧基所形成的化合物,广泛存在于动植物中,具有重要的生物功能.葡萄糖醛酸中存在高反应活性的醛基和羧基,能结合含有羟基、巯基、羧基、氨基的有毒物质,增强有毒物质的水溶性,使之快速排出肾脏,达到排毒作用.