家蚕丝腺的转录组测序分析

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家蚕是重要的经济昆虫。茧丝作为家蚕主要的效益产品,是丝绸产业的原料,也是行业产量和质量效益的决定因素。茧丝产量是家蚕品种中最受重视的性状之一。传统的育种技术是基于相互连锁的表型选择,而非基因型选择。发掘影响家蚕主要经济性状的重要功能基因,并应用于育种实践,将是突破家蚕育种技术的关键技术。随着分子生物学的发展,家蚕基因组精细图的公布,为实现影响茧丝量性状的关键功能基因的发掘和机制的分析提供了基础。转录组测序技术是进行功能基因组研究的强有力的技术手段,主要是针对某一物种特定的器官或组织在某一状态下几乎所有mRNA转录本序列。我们运用转录组测序技术构建家蚕多丝量品种(JS)和少丝量品种(L10)的差异表达谱,筛选出差异表达基因1401个(上调基因673个,下调基因738个)。随机挑选了10个差异显著的相关功能基因,应用荧光定量PCR技术对其表达量进行验证,基本与转录组测序结果一致。根据GO聚类分析和功能注释,发现上调的差异表达基因的功能主要与催化活性,代谢过程和结合功能有关。后期的工作中,我们要对这些差异显著的基因进行时空特异性研究分析,克隆基因全长序列,通过转基因、RNAi等技术验证相关基因和差异基因对家蚕茧丝量的影响。本研究获得的差异表达基因,特别是与代谢和催化相关的功能基因,可能参与丝蛋白的高效合成和分泌。为从分子水平上阐明家蚕茧丝产量性状差异形成的机制和提高茧丝产量提供借鉴。阐明茧丝产量性状决定的分子机制不仅对茧丝蛋白产量的调控机理、茧丝生产及品种选育等研究有重要的作用,也有助于开发有效的家蚕现代育种技术。对将来建立利用丝腺生物反应器高效生产特种蛋白的技术有重要价值。
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