【摘 要】
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流行性乙型脑炎又称日本乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由黄病毒科黄病毒属的日本乙型脑炎病毒(JEV)引起的一种虫媒性病毒性疾病,严重危害人畜健康.囊膜蛋白E是JEV最重要的结构蛋白,参与病毒的吸附和融合等重要的病毒入侵过程,并且与病毒的毒力、血凝性和细胞嗜性密切相关,在中和抗体的产生和保护性免疫中发挥重要作用.为了解上海市蚊源JEV的分子特征,本研究对2014年上海市
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院,南京210095 中国农业
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会
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流行性乙型脑炎又称日本乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)是由黄病毒科黄病毒属的日本乙型脑炎病毒(JEV)引起的一种虫媒性病毒性疾病,严重危害人畜健康.囊膜蛋白E是JEV最重要的结构蛋白,参与病毒的吸附和融合等重要的病毒入侵过程,并且与病毒的毒力、血凝性和细胞嗜性密切相关,在中和抗体的产生和保护性免疫中发挥重要作用.为了解上海市蚊源JEV的分子特征,本研究对2014年上海市嘉定区猪场采集的蚊媒样品采用BHK-21和C6/36细胞培养法进行病毒的分离,通过RT-PCR技术和IFA技术对分离株进行鉴定.结果 表明,分离到1株JEV,命名为JD-15,来源于中华按蚊.用分离株JD-15株分别感染BHK-21细胞和C6/36细胞,经三代盲传后细胞病变(Cytopathic effect,CPE)情况趋于稳定,72h后所有的细胞均发生病变.用分离株JD-15株脑内接种3日龄乳鼠,结果在72h内可致乳鼠死亡,表明该毒株具有较强的神经毒力.对JD-15株的E基因进行PCR扩增,将扩增产物测序并分析其核苷酸及氨基酸序列,绘制遗传进化树,结果表明,该株JEV属于基因Ⅲ型,与灭活疫苗株P3株E基因区段核苷酸相似性为98.1％,氨基酸同源性为97.9％；与减毒活疫苗株SA-14-14-2株E基因段核苷酸相似性为98.1％,氨基酸同源性为97.5％.JD-15株与SA-14-14-2株之间有28处碱基不同,其中的15个单碱基突变为同义突变,另外13个为错义突变,导致12处氨基酸位点变化,但均不处在影响病毒生物学特性的关键位点,这说明当前广泛使用的疫苗在理论上对该毒株具有一定的保护力.本研究为乙型脑炎的流行病学调查提供了科学依据,对上海市蚊虫及蚊媒病的预防和治疗具有重要意义.
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