腹泻性贝毒软海绵酸间接竞争酶联免疫学检测方法的研究

来源 :2009年上海研究生学术论坛——资源、环境与可持续发展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tropicalpalmetto
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本实验建立了赤潮藻毒素腹泻性贝毒软海绵酸(okadaic acid,OA)的竞争酶联免疫检测方法。在包被抗原浓度为1.25ug/L、单克隆抗体工作稀释度为1:20000、酶标二抗工作稀释度为1:5000、OA浓度在200~0.078 ng/ml、显色底物为四甲基联苯二胺(TMB),采用间接竞争酶联免疫反应对OA进行检测,结果得到检测曲线的回归方程和相关系数,分别为y=0.392x-0.054,R2=0.955,其中y表示抑制率,x表示log(10*OA浓度),有效线性检测范围为0.3125~50ng/ml,灵敏度即IC50为2.59 ng/ml,检测限(抑制率为20[%]时的毒素浓度)约为0.45 ng/ml,在加标浓度为12.5~500ng/ml时,回收率为87.47~96.59[%],变异系数为0.54[%]~8.75[%]。因此,该方法可满足海产品中贝类样品OA限量标准检测。
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