【摘 要】
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本研究以天堂果和黄药大头茶为实验材料,通过比较试剂盒法、改良CTAB法和改良SDS法对大头茶总DNA提取效果的影响,最终确定改良CTAB法为较佳提取方法。分析不同DNA模板用量对
【机 构】
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西南林业大学园林学院; 西南林业大学生命科学学院; 西南林业大学云南省高校园林植物与观赏园艺重点实验室;
【基金项目】
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西南林业大学科技创新基金项目(C16107);西南林业大学园林植物与观赏园艺云南省重点学科资助项目(50097401)
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本研究以天堂果和黄药大头茶为实验材料,通过比较试剂盒法、改良CTAB法和改良SDS法对大头茶总DNA提取效果的影响,最终确定改良CTAB法为较佳提取方法。分析不同DNA模板用量对扩增反应的影响,建立了适合大头茶ITS-PCR反应体系为:模板DNA60ng、Mix15μl、正反引物各1μl,总体积30.0μl,并通过梯度PCR仪确定最佳退火温度,研究结果表明:PCR扩增程序为:94℃预变性5mmin;94℃变性30s,53.7℃退火60s,72℃延伸60s,共35个循环;72℃延伸5min,4℃保存。本研究采用该体系对其进行扩增,研究结果表明扩增的条带清晰,可用于大头茶属植物的进一步研究。
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